T4DNA连接酶作为工具酶种重要的连接酶，本文将就其来源、用途和保存等方面对其进行详细介绍。

一、简介

T4DNA连接酶催化dsDNA平末端或粘性末端相邻核苷酸的5-磷酸和3-OH的连接反应。依赖ATP将ssRNA或ssDNA连接到ssRNA或ssDNA分子的5-P末端，还能将[5-32P]核苷酸、3，5-双（磷酸）加入到RNA上，但不能和全单链核苷酸连接。本公司所生产T4DNA连接酶比一般T4DNA连接酶连接效率要高2-4倍。

二、来源

大肠杆菌

三、产品用途

·催化dsDNA分子平端或粘性末端间的连接

·连接单链核苷酸

·标记RNA3-末端

·环化RNA和DNA寡聚核苷酸

·克隆长片段CDNA

四、连接酶反应缓冲液：5×

组成：150mMTris-HCl(pH7.8)

50mMMgCl2

50mM二硫苏糖醇（DTT）

5mMATP

注意事项:

1、二硫苏糖醇用于保持酶的活性。在10倍浓缩的缓冲液中，DTT在冷冻时有可能析出。如果出现这种情况，将缓冲液涡旋，使沉淀重新溶解即可，对实验结果无影响。

2、为防止ATP和DTT的降解，缓冲液应小量分装，-20℃保存。

五、酶活性定义：

0.01个Weiss单位T4DNA连接酶定义为16℃、20分钟催化连接1微克LamBDaDNA中95%以上的HindIII片段所需的酶的量。

六、保存条件：

T4DNA连接酶保存于下述缓冲液中，－20℃保存。

保存缓冲液组成：

10mMTris-HCl(pH7.0

50mMKCl

1mM二硫苏糖醇（DTT）

0.1mMEDTA

T4DNA连接酶工具酶