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T4连接酶说明书
杨小样09162021-08-04
各位大神好,我刚开始做连接,用的T4连接酶,takara的,16度连了12h,转了感受态没长菌斑,我的载体酶切后11000bp,我要连上去的片段在760bp,用的是salI和BglII双酶切后看胶图应该是没有问题,第一张图是当时酶切的图,从左至右是2kplusIIMarker,片段双酶切,片段原质粒,片段salI单酶切,片段BglII单酶切,载体双酶切,载体原质粒,载体salI单酶切,载体BglII单酶切,从图中看酶切应该是切开了,就是片段在750bp的条带有点弱,但还是有条带的。现在不太清楚是........
SNP检测方法全部snp检测技术简介
拜仁的饺子2021-08-01
我找公司做了iMLDR法,实验报告中链接反应每个位点有三个引物例如rs1492100FA:TCTCT…GGCAATTrs1492100FP:…TTTAGAGAGAAACTCCATGrs1492100FT:…GAGCTCAGCGTGGGTT这里的FA/FP/FT是什么涵义,有的是RC/RP/RT,有的是RA/RG/RPF/R应该是正向/反向,后面的字母什么涵义就不懂了?谢大神.....
【求助】Invitrogen的T4 核酸基因技术讨论版论坛
sky01222021-07-31
大家有用过Invitrogen的T4连接酶吗?说明书上是23-26度连接,一般的连接酶不都是16度吗?应该用多少度呢?另外,说明书上还说连接后为了达到更好的转化效率,应将连接反应液至少稀释5倍再转化,是这样吗?谢谢大家帮忙啊.....
t4连接酶连接平末端效率,如何提高t4连接效率功率效率网
熙熙030072021-07-28
加入PEG8000,反应体系终浓度5%.....
NEB T4DNA连接酶.doc
YE157976707292021-07-27
在使用NEB的T4DNA连接酶,想请问一下平末端连接的体系和反应温度、时间,因为之前用了10微升的体系,2微升buffer,1微升载体,6微升目的片段,1微升T4连接酶,没成功,有用过的同志们帮帮忙。.....
M0370SNEB内切酶 NEB连接酶 NEB聚合酶 M0370S 瞬时粘性末端...
kangaroo05132021-07-26
有没有人用过NEB的Blunt/TALigaseMasterMix和InstantSticky-endLigaseMasterMix?有没有人用过NEB的Blunt/TALigaseMasterMix和InstantSticky-endLigaseMasterMix?有没有人用过NEB的Blunt/TALigaseMasterMix和InstantSticky-endLigaseMasterMix?.....它说连得又快又好,想问问有木有小白鼠试过它家的这两个产品呢。。如果用过能不能请教下效果咋........
【求助】T4DNA连接酶到底反应多长时间最佳?非常急!!! 生理生化...
hefei_hefei2021-07-24
现有DNA双链,其中一条有缺口,用T4DNA连接酶封闭缺口反应体系是什么?连接酶浓度有什么要求?.....
限制性核苷酸酶与DNA连接酶分别作用于什么部位? 雨露学习互助
风音16342021-07-23
限制性核苷酸酶与DNA连接酶都是作用于磷酸二酯键。只不过限制性核苷酸酶是将磷酸二酯键切断;而DNA连接酶则是形成磷酸二酯键。.....
高中生物选修三学案:1.1 DNA重组技术的基本工具学案
2021-07-22
所有的DNA连接酶都具有专一性酶对所作用的底物有严格的选择性。一种酶仅能作用于一种物质,或一类分子结构相似的物质,促其进行一定的化学反应,产生一定的反应产物,这种选择性作用称为酶的专一性。.....
【求助】takara t4连接酶 核酸基因技术
曾小峰2021-07-21
各位大侠,我的目的基因大约1.7KB,载体大约4.7KB,做了几次连接实验均为成功,不知哪个公司的T4连接酶的连接效率较高.请大家帮忙,我很急......
沙利度胺如何治疗肿瘤? | 生命奥秘
左旋Dopa2021-07-20
沙利度胺及其衍生物通过引起两种转录因子缺失,进而达到治疗各种血液系统恶性肿瘤的惊人功效。免疫调节剂(IMiD)沙利度胺、来那度胺和泊马度胺这些小分子药物结合到cereblon(CRBN)蛋白上,随后CRBN激活CRBNE3泛素化连接酶复合物的活性。转录因子Ikaros(IKZF1)和Aiolos(IKZF3)在经过泛素(ubiquitin,Ub)分子修饰后发生降解。这一过程将会改变T细胞和B细胞的功能,并对多发性骨髓瘤(multiplemyeloma)细胞产生毒性效应。作用机制的发现历程:沙利度........
下列说法正确的是() A.DNA连接酶最初是从人体细胞中发现的B.限制...
你猜44232017-10-03
DNA连接酶是1967年在三个实验室同时发现的,最初是在大肠杆菌细胞中发现的.DNA连接酶主要是连接DNA片段之间的磷酸二酯键最初从原核生物(大肠杆菌)分离得到的.现在生物基因工程主要是从T4噬菌体中分离得到的,.....
【DNA连接酶和DNA聚合酶分别作用与什么时期,作用于哪?】
2017-10-03
DNA连接酶用来连接具有互补末端的双链DNA,其最适温度是37℃,但由于其在高温不稳定,所以一般是16℃连接过夜。DNA聚合酶是用来复制DNA的,在体内的最适温度是37℃,我们做PCR常用的酶也是聚合酶,其最适扩增温度是72℃。.....
请问dna连接酶,聚合酶,解旋酶,限制酶,分别作用于哪个部位?画...
2017-10-03
限制性内切酶:可以切割磷酸二酯键DNA连接酶:可以连接被限制酶切割开磷酸二酯键.....
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