第1天

1.大约1.5cm长的尾部活检样品放在一个1.5ml盛有0.7ml尾部缓冲液的小离心管中，加35μl10mg/ml蛋白酶K，在55℃振摇温育过夜。

尾部缓冲液（配25ml）

50mmol/LTris，pH8                          1.25ml1mol/LTris，pH8

100mmol/LEDTA，pH8                       5ml0.5mol/LEDTA，pH8

100mmol/LNaCI                                 0.5ml5mol/LNaCI

1%SDS                                             1.25ml20%SDS

存放于室温。

蛋白酶K：10mg/ml水溶液，贮存于-20℃。

第2天

2.加7μl10mg/mlRNA酶（不含DNA酶），在37℃孵育1~2小时。

3.在微量离心机中对样品离心20分钟以沉淀鼠毛。

4.小心转移0.5ml上清，注意不要搅动沉淀。

5.在管子中加0.5ml异丙醇并通过翻转轻轻地进行混合。应该立即有线状沉淀形成。

不要剧烈混合。不要使DNA形成紧密团块，否则会难以绕缠。

6.在Bunsen灯的火焰上加热封闭100μl玻璃小吸管的末端。

7.把末端封闭的小吸管浸到DNA溶液中并剧烈搅拌来缠绕DNA。一直搅动吸管直到DNA紧紧地缠绕到上面。

8.洗DNA是在三个顺序排列的盛大约50ml乙醇的烧杯中各浸10次（1个是70%乙醇，另2个是100%乙醇）。洗5~8个样品后换洗涤溶液。

9.用一片胶带标记玻棒末端，把它插在（DNA端朝上）一块橡皮泥，使风干10~15分钟。

10.用钻石记号笔在黏附了DNA的那一末端刻线，弄断玻棒，把带DNA的那段放到已作标记的微量离心管中。

11.加0.5mlTE(pH8)。样品在室温下振荡过夜。

第3天

12.稍稍振荡管子，用干净镊子拿掉玻璃棒（在不同样品的操作之间烧一下镊子）：继续振摇1~2小时。（如果样品只是用来进行PCR分析，玻棒可以留在管子里）。

13.以1:10稀释样品，测OD₂₆₀值以确定浓度（1OD₂₆₀=50μg/ml).

14.DNA贮存在4℃。