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2021-07-20【求助】DNA提取纯化做酶切

山中树
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我想从植物中提取总DNA做酶切来扩增启动子,但是不论怎么纯化,用平末端的酶老是切不动,请问各位大虾有没有什么高见啊?!对了,我用的是CTAB法,在用无水乙醇沉淀之后不离心直接用枪头把DNA挑出来了洗了,但是还是切不动.好烦啊,请教各位大虾了!
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相关回复

已帮助 0人

回复：时间：2021-07-28

是所有的酶都切不动还是就一个酶切不动呢？如果是前面一种情况，通过测量A260/A280和跑胶，看一下DNA质量如何，如果蛋白或者多糖太多，那就重新纯化吧。如果是后面一种情况，看看是否有甲基化的影响以及酶本身是否有问题。

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回复：时间：2021-07-23

谢谢楼上的,我是平末端的酶切不动,粘末端的切动了,但是继续纯化的话DNA又降解了.

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回复：时间：2021-07-20

我也想做这个，但是提取的DNA都是断裂的，哭

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