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大家好,本人对免疫学不是很懂,现在从植物中克隆到一个基因,大肠杆菌重组表达后为包涵体,包涵体含有HIS标签,已经经过亲和纯化,如果用这种纯化的包涵体去免疫兔子,得到抗血清应该没有问题,请问大家用这种抗血清去检测我植物中对应的天然蛋白成功率如何?
因为包涵体毕竟是变性蛋白,得到的抗体去检测具有天然结构的活性蛋白,感觉有些不妥,请明白的高手指点一下!
因为包涵体毕竟是变性蛋白,得到的抗体去检测具有天然结构的活性蛋白,感觉有些不妥,请明白的高手指点一下!
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回复:时间:2009-10-25
如果你天然结构的蛋白在需要的某个表位也存在连续的氨基酸,应该还是有可能检测到的,但是这个风险很大。可以尝试换个能够表达可溶性蛋白的载体试试,或者合成需要检测表位的一小段肽来初步检测下。
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