临床研究方案

mayitao  /发布时间:1630863004 /浏览量:476   

提供商：	Genloci
服务名称：	抗体表达

❀实验流程

1.亚克隆：将客户优化好的目的基因（吉锐生物也可以提供基因优化服务）克隆到吉锐生物定点整合载体上；
2.转染：采用独家的CHO-MCI（多拷贝整合）技术，将定点整合载体电转到CHO-SC细胞中；
3.稳转池验证：30ml摇瓶小试表达目的蛋白并纯化。将细胞培养上清通过合适的，可与重组表达目的蛋白的标签结合的柱填料进行纯化，SDS-PAGE跑胶，同时通过上牛血清白蛋白（BSA）作为对照带进行定量和纯度分析。
4.扩大培养：根据30ml的定量结果，估算获得客户要求数量的蛋白所需要扩大培养的体积，拿到足够量的蛋白。

❀实验案例

案例1：

案例2：
 利用MCI技术将红色荧光蛋白基因定点整合到CHO-K1细胞基因组中，配合使用Genloci®的独创产品CellPlaza™（GP5036）筛选阳性克隆，扩大培养后，在倒置显微镜下和荧光显微镜下观察细胞。


案例3：
     利用MCI技术将客户的目的基因整合到CHO细胞基因组中，配合使用Genloci®独创产品CellPlaza™（GP5036）筛选阳性克隆，ELISA结果分析显示，在挑选的32个克隆中，共有16个克隆的抗体表达量较高，其中3个克隆的表达量超过12.5ng/mL。

案例4：表达pool验证
     抗体Y125mL摇瓶pool上清SDS-PAGE检测见figure3，CHO-SC上清纯化后可得蛋白272mg/L，同样条件传统CHO-S上清纯化后可得蛋白125mg/L。生产周期4-5周，产量达到mg/10mL，满足很多客户要求，省去了很多等待时间。

================  蚂蚁淘在线  ================

免责声明：本文仅代表作者个人观点，与本网无关。其创作性以及文中陈述文字和内容未经本站证实，对本文以及其中全部或者部分内容、文字的真实性、完整性、及时性本站不做任何保证或承诺，请读者仅作参考，并请自行核实相关内容

版权声明：未经蚂蚁淘在线授权不得转载、摘编或利用其他方式使用上述作品。已经经本网授权使用作品的，应该授权范围内使用，并注明“来源：蚂蚁淘在线”。违反上述声明者，本网将追究其相关法律责任。