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小弟是单抗新手,目前我有分别构建的PET32a和PET30a为载体表达的重组蛋白,想用来免疫做单克隆抗体.
我的问题是PET32a和30a用哪个好些?PET32a表达似乎带有融合的TRX蛋白什么的,单抗不好筛选:(
另外我的重组蛋白想以HIS-镍柱纯化,不知纯化的纯度应达到什么程度,才合适做单抗?
请各位大侠指点!
我的问题是PET32a和30a用哪个好些?PET32a表达似乎带有融合的TRX蛋白什么的,单抗不好筛选:(
另外我的重组蛋白想以HIS-镍柱纯化,不知纯化的纯度应达到什么程度,才合适做单抗?
请各位大侠指点!
相关回复
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已帮助 0人
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回复：时间：2009-10-24
如果是免疫用的蛋白，纯度在95%以上就可以了。但是用于检测的蛋白纯度还是要高写比较好。如你所说的pet32a带有trx，可以将这个去除掉，用his标签纯化得到重组蛋白。
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已帮助 0人
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