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夹心法ELISA
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如何拟合Elisa标准曲线
saras2021-08-25
请教各位大神：我现在用商品化的试剂盒进行夹心法ELISA测定某抗体的浓度，盒子给定了4个标准品，标准品抗体浓度为70000~1000单位，测定步骤中要求对样品进行1:1000稀释后测定。但是有的样本按照1:1000稀释后，最终OD值大于70000浓度的标准品的OD值，然后使用ELISACALC软件进行四参数拟合，超过了标准曲线的范围，就算不出来这个样品的浓度，但是如果在1000-70000之间的OD值就可以算出相应浓度。请教大神们，接下来我是否可以对样品进行1:2000,1:4000浓度稀释，算........
ELISA双抗体夹心法 实验方法
chenmaner75742021-08-24
手头有P蛋白的鼠单抗和兔多抗，现在想检测培养的肿瘤细胞中P蛋白的含量，用竞争法太浪费抗原了，想用下面的方法（类似夹心法）：包被单抗（过量）——抗原37度1小时——多抗37度1小时——二抗——显色按道理应该可行，但有一个问题：兔二抗对鼠一抗也会反应吗？.....
【求助】双抗夹心法ELISA测抗原,曲线拟合时是否一定采用四参数?_...
xiaowu20082021-08-23
双抗夹心法ELISA测抗原，曲线拟合时是否一定采用四参数?.....
ELISA检测方法有哪些？
2021-08-22
双抗体夹心法1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。（简称洗涤，下同）。2.　加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。（同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔）。3.　加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体（经滴定后的稀释度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。4.　加底物........
可用于elisa的抗体有哪些类型
夏轩D咳睁02021-08-21
ELISA的类型ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。在这种测定方法中有三个必要的试剂：（1）固相的抗菌素原或抗体，即"免疫吸附剂"（immunosorbent）；（2）酶标记的抗原或抗体，称为"结合物"（conjugate）；（3）酶反应的底物。根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体条件，可设计出各种不同类型的检测方法。用于临床检验的ELISA主要有以下几种类型：2.2.1 双抗体夹心法测抗原双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法，操作步骤如下：1） 将特异性抗体与固相载体联结，形成固相抗........
ELISA双抗体夹心法
gaochangjian72021-08-20
http://wenku.baidu.com/view/9b2aea155f0e7cd184253638.html.....
【求助】求助:如何提高双抗体夹心法ELISA的灵敏度? 免疫学讨论...
十妞XNOM2021-08-19
1.加大生物素标记的多抗的用量；2.加大辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素；.....
ELISA法中双抗体夹心法测抗原的步骤是什么？_
lishan81252021-08-18
双抗原夹心法步骤：请大家帮帮忙，第一步加完抗原后必须封闭吗.....
酶联免疫吸附试验测AFP——ELISA双抗体夹心法
2021-08-17
ELISA双抗体夹心法测afp的目的和原理?.....
ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法的比较
小芯9月6日2482021-08-16
双抗体夹心法：(1) 包被：用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。(简称洗涤，下同)。(2) 加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。(3) 加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5～1小时，洗涤。(4)........
【求助】夹心法ELISA测样品浓度过高,使用ELISA CALC进行四参数...
memesasa2021-08-15
我做的是血清中IKZF3测定，由于没有现成的试剂盒，自己从国内的CUSBIO定制的，分批订货。。前两次的标准曲线形状和公司提供的基本近似。但这一次却差太远。我做出来的近似线性，而公司提供的还是和原来的...........
请教,ELISA中的棋盘滴定法,谢谢,急用_问答详情_夹心法ELISA_...
35126452021-08-14
买的夹心法ELISA试剂盒，样品处理参照国外文献报道，豆类匀浆过夜浸提9000转离心取上清，按照试剂盒操作方式，结果发现10的5、6、7、8次方稀释度所测OD值结果基本一致，都在0.2-0.3之间，样品之间变化不大，如果按照文献理论报道含量应该是7次方的时候在检测限范围内，但7次方各个样品的OD值差异不显著，标曲相关性在0.99以上，OD值范围在0.07到0.85之间；后采用豆粉浸提12000g离心取上清的方式，发现10的5、6、7、8次方稀释度所测OD值随着稀释度的升高而增大，比如一个样品的O........
请问采用ELISA 双抗体夹心法测乙肝表面抗原为什么要多次洗涤? ...
猩捓2021-08-13
冲洗不净，残留的酶结合物会分解底物显色，引起本底太高而出现错误.....
为什么会出现HBsAg与抗HBs双阳性阳性？
liyouqiang6662021-08-11
本人用一重组蛋白（该蛋白存在于人体的血清中）制备了该蛋白的单克隆抗体和多克隆抗体，并且单多克隆抗体都用竞争法证实了可以识别血清中该蛋白的天然形式。目前，我用该蛋白的鼠源性单抗来包被ELISA板子，5%BSA37度封闭二小时后，洗涤四次后将板子分三个组加入抗原：其中一个组中加入的是我重组的蛋白，另一个组为用其它方法证实含该蛋白的人体内血清，最后一个组加入PBS。37度一小时后洗涤四次后每孔加入我制备的兔源性多抗。37度一小时洗涤六次后我再加入酶标记的抗兔的抗体37度40分钟后洗涤六次后TMB显色。........
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