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疾控专家:基因测序发现新发地病毒来自欧洲方向
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| 试剂、试剂盒 | 质粒提取试剂盒限制性核酸内切酶 仪器、耗材 | 离心机振荡培养箱电泳装置冰盒恒温水浴箱
实验步骤 | 1. 挑取含有目的DNA重组体的单个菌落接种在3mlLB（含有Amp或Kan）液体培养基中，37℃，225rpm培养12～16hrs。 2. 提取质粒 ⑴离心菌液，废弃上清。 ⑵加入250ulBufferP1，使菌片重悬，务必使片状物不可见。 ⑶加入250ulBufferP2，上下颠倒EP管4～6次，操作时间要少于5min。 ⑷加入350ulBufferN3，上下颠倒EP管4～6次，可见絮状沉淀。 ⑸离心13000rpm，10min。 ⑹离心后的上清液移入PrepSpinColumn。 ⑺13000rpm离心30～60Secs，弃滤液。 ⑻加入0.5mlBufferPB，13000rpm离心30～60Secs，弃滤液。 ⑼加入0.75mlBufferPE，13000rpm离心30～60Secs，弃滤液。 ⑽13000rpm再离心1min，弃滤液。 ⑾将PrepSpinColumn加到新的1.5mlEP管上。 ⑿加50ulBufferEB至滤膜中央，室温静置1min，13000rpm离心1min。即获得所需质粒。 3. 酶切鉴定 反应体系（20ul体系）：  反应条件：37℃2-3hrs 4. 电泳：观察酶切结果。
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