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我用的是CLONTECH公司的反转录试剂盒，他分两步进行，以便为接下来的RACE作基础。试剂盒提供的有阳性对照MRNA，我的实验样本和对照一起做下去（反转录—RACE）。电泳结果是阳性对照扩出了预期大小的片段，我的标本没东西出来。我有几点想不清楚，请各位指教：1如何判断我的样本反转录是否成功，即反转录酶能到达5’或3‘的末端。2如果5’或3‘末端GC含量高，是不是要换用可耐高热的反转录酶，有这种酶吗？3是不是5’或3‘末端二级结构很复杂，高温也打不开，有什么其他的办法吗？4对于扩增全长，各位有什么好方法吗？眼看就要开题了，实验还毫无结果，真不知道是不是要延期毕业了！！！
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