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jarnoyvonne2021-08-06
本人是DNA跑变性PAGE的小白，现在正在设计实验，DNA单链上带有Biotin修饰，跑变性PAGE后，转膜敷抗体，要用什么抗体显biotin呢？是直接用biotin的二抗吗？求教各位大神~~~~.....
由德林等破译DNA磷硫酰化修饰基因组分布图谱资讯...
wangyy19902021-08-05
[编者按]一百多年来，交大人用知识和智慧创造累累硕果，谱写了近现代史上的诸多“第一”。这是人才培养的智慧、科学研究的智慧、服务社会的智慧、为国争光的智慧。新闻**推出“交大智慧”专栏，聚焦交大人的智慧之光，展现交大人为国家发展和社会进步作出的重大贡献。近日，国际微生物学权威期刊MolecularMicroBIOLOGy在线发表了上海交通大学生命科学技术学院、微生物代谢国家重点实验室由德林教授研究小组的最新研究进展“RegulationofDNAphosphorothioatemodificati........
甲基化亚硫酸氢盐修饰后测序法
0虫虫02021-08-04
目前我准备做甲基化PCR，由于经费问题，可能无法购买高价的试剂盒。看过甲基化PCR的原理后，在考虑经过修饰后，是否可以用RT-PCR的试剂盒（有现成的）来做甲基化PCR。请大牛指导！另求各位推荐性价比高的亚硫酸盐修饰试剂盒，谢谢！.....
DNA 亚硫酸氢盐修饰和纯化操作步骤
doctoryangjp2021-08-03
亚硫酸氢盐修饰DNA步骤一、内切酶作用体系：（自建立，试过，效果很好）EcoRⅠTaKaRa消化DNA37℃3hddH2O11ulH溶液2ulEcoRⅠ1ulDNA6ul37℃孵育3h二、亚硫酸氢盐修饰过程：（翻译稿）1.用适合的内切酶消化大分子量的DNA（避免目的基因被切割），或者通过把DNA悬于蛋白酶k/SDS缓冲液，通过26gaugeneedle5次，37℃孵育30min（降低DNA大小，利于充分变性）2.加2.2ul新鲜配制的3MNaOH到18ulDNA样品中，搅拌混匀，短暂离心。3.3........
...Cas9核酸酶,有望更容易地进行基因组编辑 生物研究专区
龙神VM59VJ2021-08-02
虽然CRISPR有许多优点。 三种系统的比较 那么。三个其他的小组利用更系统的方法在人类细胞中评估了CRISPR的脱靶活性。例如，CRISPR能使基因组更有效地产生变化或突变，具有Cas9n的gRNAs的碱基对能够诱导具有徒步部分的DSBs，其中比较典型的模式是依靠一个复合物。相反。因为CRISPR产生了一个非粘性末端, 1996)，并且其酶促死的版本也可以通过慢病毒进行传递。当前，并且产物具有可扩展性，细胞系和转染方法。 TALEN TALENs中文名是转录激活因子样效应物核酸酶，在在II型C........
—邓子新团队DNA骨架硫修饰研究获新突破
freelane2021-07-31
邓子新团队DNA骨架硫修饰研究获新突破------发现两种全新的细胞自我防卫机制来源：上海交通大学近日，上海交通大学邓子新院士团队对DNA骨架硫修饰生物学意义的研究又获得两项突破。聚焦核酸研究的著名国际学术刊物《核酸研究》（NucleicAcidsResearch）以特写文章（Featuredarticle）发表了由该团队由德林副教授主持，博士生徐铁刚和姚芬为共同第一作者的论文——“沙门氏菌中与DNA骨架上硫修饰直接关联的一种新的限制系统”。该论文报道了一种新的宿主专一性限制-修饰系统，它与以前........
DNA水解酶能够水解环状DNA吗?_
灼眼丶夏娜侄2021-07-30
不存在不能被DNA水解酶水解的DNA。 DNA水解酶，用于切断磷酸二酯键的酶，这些酶使糖-磷酸酯主链上的磷酸二酯键水解.一般分为两种：外切核酸酶和内切核酸酶。 简介： 原理 DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在DNA聚合酶与启动子的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。在实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，并设计引物做启动子，加入DN........
【求助】甲基化修饰后的DNA浓度? PCR技术讨论版论坛
danbai2021-07-29
想请问各位，甲基化修饰后测量DNA的浓度一般是多少啊？修饰前有250ng/ul，修饰后只有25ng/ul，请问你们测的修饰后的浓度有多少？我的值正常吗？这个浓度做pcr行吗？要上多少微升dna啊。.....
生物选修三专题一基因工程是RNA聚合酶识别和结合的部位,它能...
詛躷囖482021-07-27
基因工程中聚合酶不是基本酶的原因：DNA聚合酶是将单个的脱氧核苷酸加到原有的DNA片段上的，所以不用！DNA聚合酶是不论何种片段强制连接的，而聚合酶是连接有特定顺序的碱基对片段的DNA。基因工程常见几种酶比较：DNA聚合酶： 在DNA复制时起作用，将多个脱氧核苷酸催化聚合为脱氧核苷酸链（也就是DNA单链），此时形成的化学键是磷酸二酯键。DNA解旋酶： 在DNA复制或转录时起作用，将DNA的双链解开，作用对象是氢键，使氢键断裂 DNA水解酶： 在消化道或细胞内起作用，将DNA水解为脱氧核苷酸，作用........
转座酶
kaiyue12112021-07-26
这种问题只能问佳学基因解码专家。.....
DNA 甲基化修饰
萝莉控听说1234562021-07-24
今天晚上开始做甲基化修饰DNA实验，由于没有试剂盒，需要自己配置所有容易来进行修饰。晚上溶解亚硫酸氢钠时，由于太晚了，着急走，就在管子底部还有少许结晶沉淀的情况下，就加入到EP管中了。这样对于整个甲基化修饰影响大吗？？担心啊。.....
限制性核酸内切酶为什么不切自己的DNA？如：大肠杆菌自己含...
Love柯南3002021-07-23
限制性核酸内切酶是可以识别DNA的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类内切酶，简称限制酶。自身dna没有这个特异序列.....
DNA甲基化详解
waterf212021-07-22
本人甲基化菜鸟，最近用的EpiTectBisulfiteKit（Qiagen）重亚硫酸盐试剂盒，修饰前OD260/OD280测得值1.8左右，DNA浓度10-20ng/ul，修饰后测得DNA浓度20-30ng/ul，并且OD260/OD280测得值大于3.0，考虑DNA碎裂，单核苷酸形成。各位对下述问题有何建议：1.怎样防止DNA碎裂（亚硫酸盐处理试验期间，DNA保护buffer有效）。2.什么公司的重亚硫酸盐修饰试剂盒处理后的DNA较稳定，可以继续后续试验。谢谢！.....
核酸酶的分类与发展史技术文章上海邦景实业有限公司
TSˊ控白2021-07-21
20世纪70年代，在细菌中陆续发现了一类核酸内切酶，能专一性地识别并水解双链DNA上的特异核苷酸顺序，称为限制性核酸内切酶（restriction endonuclease，简称限制酶）。当外源DNA侵入细菌后，限制性内切酶可将其水解切成片段，从而限制了外源DNA在细菌细胞内的表达，而细菌本身的DNA由于在该特异核苷酸顺序处被甲基化酶修饰，不被水解，从而得到保护。限制性核酸内切酶的研究和应用发展很快，已提纯的限制性核酸内切酶有100多种，许多已成为基因工程研究中必不可少的工具酶。限制性核酸内切酶........
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