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回复:时间:2021-08-19
1.慢病毒感染⑴第一天按实验需要将细胞铺板(比如24孔板)。细胞数以第2天密度约50%为宜。37℃培养过夜。⑵第二天感染前,从-80℃冰箱取出病毒后冰浴融化,参考相关文献或者根据预实验得到的MOI值用新鲜完全培养基将病毒稀释成所需浓度。注意:轻轻混匀,不要使用振荡器。⑶吸去细胞原有培养基,将按照MOI稀释好的病毒液+培养基+Polybrene(对于293细胞,终浓度6μg/ml)加入细胞中,轻轻摇匀。37℃培养过夜注:病毒液-培养基-Polybrene混合液,按如下操作制备混合液:①添加完全培养基(60mm培养皿2ml,100mm培养皿3ml),37°C预热;②加入病毒轻轻混匀;③加入Polybrene至终浓度为2μg-12μg/ml。轻轻混匀。以上每个成分需要按顺序加入。当MOI高于20时,我们建议客户添加Polybrene(终浓度2~12μg/ml,浓度因不同的细胞而异,具体的请参考相关文献)来提高病毒的感染效率。详情情可以去http://www.hanbio.net/cn/products/item/12094看看
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