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请教荧光定量PCR结果图
小新20182021-08-22
本人最近接触荧光定量PCR上机之后图片是这样的不知道问题出在哪里希望有老师可以帮忙看一下谢谢第一个和第二个图片是目的基因第三个是内参.....
定量PCR常见问题（二）
2021-08-21
PCR 测受体太不靠谱，mRNA的量和蛋白量不是线性关系，尤其是受体。如果要测量细胞表面2个受体的比率，最好用流式细胞仪来测量.....
普通PCR与实时荧光定量PCR的区别
布美男00182021-08-20
荧光定量PCR是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针，对PCR产物进行标记跟踪，实时在线监控反应过程，结合相应的软件可以对产物进行分析，计算待测样品模板的初始浓度。|||原理不同：荧光定量pcr实时监测与dna结合的荧光染料激发的荧光；普通pcr通过检测插入dna中核算染料的量来测定pcr最终产物量，一般是紫外光。反应要求：荧光定量对扩增片段有较高的要求，一般为100-300bp；普通定量可以扩增长点的片段。如果不需要检测产物分子量大小，荧光定量可以不进行电泳就对产物进行定量分析，普通pcr必须........
实时定量PCR时用的ROXrefence有什么作用
旧人旧城丶捈h2021-08-19
ROX Reference Dye,可用于需要Dye的Real Time PCR扩增仪,用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR扩增仪上,用以校正孔与孔之间产生的荧光信号误差.并不是每次都会用到.一般有ROX Reference Dye和ROX Reference Dye II两种,针对不同的PCR仪.一般ABI PRISM 7000/7700/7900HT和7300 Real-Time PCR System使用ROX Reference Dye,而7500 Real-........
【讨论】关于miRNA定量PCR时引物的一些迷惑,希望高手来指点 实验方 ...
cneagle662021-08-18
请教园友：一般做mRNA表达的时候，需要注意提取的RNA中是否有DNA污染，或者通过设计跨内含子的引物来解决。那么，检测MmiRNA的时候，需要注意RNA中DNA污染的问题么？.....
【求助】关于荧光定量pcr扩增曲线和溶解曲线的问题 核酸基因技术...
月亮欠我九条鱼2021-08-17
跑到还有半小时的时候，跳出一个对话框：“analysiscannotproceed:notenoughsamplesdefined”，最后做出来的结果有扩增曲线但是没有熔解曲线，请各位大神帮忙解释一下。.....
荧光定量PCR测起始拷贝数干什么用
天空飘飞的云2021-08-16
这个指的就是样本中原有目标DNA的数量。在另外的一组管子中，加入已知拷贝数的DNA同时扩增，每个管子中加入的数量是不同的，但是从最小数目到最大数目的这个范围涵盖了样本中DNA拷贝数。PCR反应完成后，把已知拷贝数DNA的量和PCR荧光Ct值制成标准曲线，再把待测样本的CT值和该标准曲线比对，就可以得到样本中的起始拷贝数了.....
荧光定量PCR问题疑难解答
Mis願2021-08-15
realtimeRT-PCR，测了模板CDNA浓度1800ng/ml，纯度在1.96左右，但是检测内参GAPDH，CT值都有30多，目的基因的CT更大了。请问问题在哪里，CT值大不就是因为模板量不够吗，可是现在这个浓度显然是充足的，怎么解释？.....
请教大神!荧光定量PCR cDNA加样量的问题 PCR技术讨论版...
nanakaro2021-08-14
各位战友我实验室用的是Therimosci公司的SYBR试剂盒，说明书上要求DNA的量<500ng但是测得CDNA浓度都在1000-2000多ng/ul我第一次没注意500ng的问题就直接加了2ulcDNA结果CT值非常高如果按500ng算，加的就不到1ul的量了，这样CT不是更高了嘛这样加对吗？？.....
实时荧光定量pcr分析中cy5,fam,red是什么意思？悟空问答
櫴7潩鳧4蝕2021-08-13
普通的PCR大多数是定性实验，而实时荧光定量PCR则定量和定性都可以做。应用领域也不一样，普通PCR一般应用于基因组克隆、DNA测序、RNA反转录等，而实时荧光定量PCR一般应用于mRNA表达量分析、绝对定量、蛋白表达、SNP分析、阴阳性解析等领域。不是定量PCR比PCR好，而是两者应用与不同的领域，起到了不同的作用。荧光定量PCR较普通PCR不同的一点就是可以实时检测PCR扩增产物，从而可进行绝对定量或者相对定量。.....
Taq酶扩增多长片段
胜仔2021-08-12
本人之前尝试过用普通的Taq酶扩增2kb的条带，但是老是扩不出来。:(我想问一下各位老师有没有试过用普通的Taq酶扩长片断呢？另外还有个问题就是要是我用PrimeSTARTMHSDNApolymerase可以扩出长片断吗？谢谢。.....
荧光定量PCR vs. 恒温扩增,谁才是分子诊断的未来? 扫码关注公众号↓...
固始县80tcTG2021-08-11
PCR相关技术问题，可搜索oneshine，在交流专区，有比较全面的技术信息，希望能帮到你.....
荧光定量PCR检测需要多少费用啊
136328440802021-08-10
定量检测包括总RNA提取和纯化、（可能还需要做mRNA提取和纯化）、RT、定量PCR还需要反转录用的引物、定量PCR用的一对引物、荧光信号源（荧光染料或荧光标记的探针，看你用什么策略来做定量PCR）报价要看你需要服务商提供什么服务，如果你只提供实验材料，要求服务商做以上全部工作，只检测一个指标（一个基因的表达水平变化），价格大约每个样品350-500元，多一个指标大约多90元。一般至少做一组数据两个样品嘛，所以你按1000块一组样品预算吧。.....
【求助】请教做荧光定量PCR需要哪些试剂啊？问答
子乔00KJ112021-08-09
如果你想做荧光定量PCR的根据实验思路来说应该需要一下试剂和仪器1.模板提取（一般为RNA）：Trizol、氯仿、异丙醇、无水乙醇、DEPC处理水2.模板浓度测定：分光光度计或NanoDrop3.逆转录：逆转录试剂盒（或者一步法试剂盒），这一步可以用普通PCR做，也可以用水域做。4.荧光定量PCR试剂：通常有用SYBR Green Mix做的，但是这里建议你用EvaGreen做，灵敏度和平行性都要好于SYBR Green，并且如果你那是ABI或者Stratagene的PCR如果用SYBR Gre........
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