2021-07-29【求助】细胞裂解液加多少量？

【1】哈，可以把裂解液用量调整为50－100微升。【2】加入裂解液后可以加用超声破碎细胞。【3】提完细胞的器具可以在显微镜下看一下，剩余的细胞还多不多。如果还多，说明细胞提取的不彻底，还要改进方法，争取提取的细胞彻底一些。

一般推荐量是10cmdish/500ul.其他体系根据培养细胞表面积类推.如果细胞特殊,则量还需更改.

加入裂解液时一般每10^6个细胞加入0.1ml裂解液。是如果此条件下最终提取物蛋白浓度应该不低于5mg/L。一般情况下，可参考下述的使用条件，但细胞数目会因细胞的大小而变动，对于特别大或特别小的细胞，需要自行计数，摸定条件。6孔板的单孔(1～2×10^6细胞)，加入0.1~0.2ml；25cm^2培养瓶(3～6×10^6细胞)，加入0.3~0.6ml；75cm^2培养瓶(1～2×10^7细胞)，加1~2ml。

1、我的培养瓶是25的，每次用200μg的细胞裂解液，蛋白很浓2、建议用细胞刮刀，冰上裂解

谢谢大家的帮助！

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