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大鼠一氧化氮合酶(NOS)ELISA试剂盒 说明书_实验方法_
类风湿关节炎(rheumatoidarthritis,RA)是一种自身免疫性疾病,表现为对称小关节的慢性关节滑膜炎症,而且以炎症的持续反复发作为主要特征。RA完整的发病机制并不明确,其病程表现为关节滑膜增生和血管翳形成,继而造成关节软骨的破坏,最终导致骨、关节坏死从而致残。
胶原抗体诱导型关节炎(collagenantibodyinducedarthritis,CAIA)是目前研究RA常采用的造模方式,该模型突出特点是能在几天之内迅速发病,关节组织中巨噬细胞和多核型白细胞浸润,很好的体现了外源性抗原抗体刺激体诱导的严重关节损伤。此模型是研究类风湿性关节炎发病机制和治疗药物筛选的理想模型。
Chondrex公司的胶原单克隆抗体组合(Arthrogen-CIA®5-CloneCocktailKit)可用于小鼠关节炎诱导(CAIA)研究。自1985年Chondrex公司生产并销售4-clonecocktail(Arthrogen-CIA®arthritogenicMonoclonalAntibody)kits开始,胶原抗体诱导关节炎(CAIA)方法得到广泛使用。CAIA成模周期短,只需24-48h就可诱导出严重风湿型关节炎。改进升级的5-clonecocktailkit不仅延续4-clonecocktail的建模优势,而且提升了在各种小鼠中高效诱导关节炎的持续性、稳定性,甚至在CAIA低应答性的C57BL/6小鼠,以及转基因改造或难以预测具体基因敲除的C57BL/6(H-2b)或129/Sv(H-2b)小鼠中都成功建模。
产品信息
7-8周龄或更大的小鼠
(一)联合使用单克隆抗体混合物和LPS来诱导CAIA敏感性小鼠关节炎((DBA/1,Balb/c,B10.RIII,C.B-17,scid/scid,or129/Sv))
第0天:静脉或腹腔注射1.5mg的5-克隆混合物
第3天:腹腔注射25-50ug的LPS
注意:在3-4天时可以观察到关节炎由温和至严重,7-10天时达到最严重。
(二)联合使用单克隆抗体混合物和LPS来诱导低反应性小鼠关节炎((C57BL/6orC57BL/6background)
第0天:静脉或腹腔注射5mg的5-克隆混合物
第3天:腹腔注射25-50ug的LPS
注意:在3-4天时可以观察到关节炎由温和至严重,7-10天时达到最严重。可在10-14天时再次注射LPS再次刺激炎症关节炎。
(三)利用单克隆抗体混合物诱导DBA/1andBalb/c小鼠关节炎
第0天:静脉注射6-10mg的5-克隆单克隆抗体
注意:在2-3天时可观察到关节炎。此种方法在其他的CAIA敏感性小鼠中还没有得到验证。
小鼠对单抗混合物和LPS的易感性受品系、饲养条件、个体差异及动物的处理和生存环境等影响。建议SPF级条件,因为传统条件时,细菌污染可能使动物产生免疫反应,只产生轻微的关节炎。建议在大规模实验前,先用小样本量做初步研究。研究者应根据自身实验需求,选用最合适的免疫程序。
产品规格/价格货号mAb混合物LPS报价(元) 5301010mg(10mg/mlx1ml)0.5mg(0.5mg/mlx1ml)10696 5304040mg(10mg/mlx4ml)1.5mg(0.5mg/mlx3ml)42437 53100100mg(10mg/mlx10ml)3.5mg(0.5mg/mlx7ml) 参考文献
1)YoshinoS.etal.J.ImmunolMethods343:49-55(2009)
2)TeratoK.etal.Autoimmunity22:137-147(1995)
3)TeratoK.etal.J.Immunol.148:2103-2108(1992)
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胶原抗体诱导型关节炎(collagenantibodyinducedarthritis,CAIA)是目前研究RA常采用的造模方式,该模型突出特点是能在几天之内迅速发病,关节组织中巨噬细胞和多核型白细胞浸润,很好的体现了外源性抗原抗体刺激体诱导的严重关节损伤。此模型是研究类风湿性关节炎发病机制和治疗药物筛选的理想模型。
Chondrex公司的胶原单克隆抗体组合(Arthrogen-CIA®5-CloneCocktailKit)可用于小鼠关节炎诱导(CAIA)研究。自1985年Chondrex公司生产并销售4-clonecocktail(Arthrogen-CIA®arthritogenicMonoclonalAntibody)kits开始,胶原抗体诱导关节炎(CAIA)方法得到广泛使用。CAIA成模周期短,只需24-48h就可诱导出严重风湿型关节炎。改进升级的5-clonecocktailkit不仅延续4-clonecocktail的建模优势,而且提升了在各种小鼠中高效诱导关节炎的持续性、稳定性,甚至在CAIA低应答性的C57BL/6小鼠,以及转基因改造或难以预测具体基因敲除的C57BL/6(H-2b)或129/Sv(H-2b)小鼠中都成功建模。
产品信息
- Kit由小鼠mAb混合物和LPS组成:
mAb混合物是抗II型胶原蛋白的5个单克隆抗体的混合物,包括cloneA2-10(IgG2a)、F10-21(IgG2a)、D8-6(IgG2a)、D1-2G(IgG2b)、D2-112(IgG2b),识别多种物种中Ⅱ型胶原蛋白的保守抗原表位。其中,ClonesA2-10、D1-2G、和D2-112识别在II型胶原蛋白CB11片段(124-402)上的167个氨基酸片段LyC1(124-290)簇集的抗原表位,ClonesF10-21和D8-6识别II型胶原蛋白的CB11片段(124-402)上的83个氨基酸多肽片段LyC2(291-374)上簇集的抗原表位。 - mAb来源于小鼠,溶解于PBS中,pH7.2,浓度为10mg/ml。
- LPS是内毒素的一种,来自E.Coli0111:B4,用于刺激免疫反应,生成动物模型,如果不用LPS免疫,关节炎的严重程度会降低。
7-8周龄或更大的小鼠
- CAIA高敏感性小鼠:DBA/1,Balb/c,B10.RIII,C.B-17,scid/scid,或129/Sv
- CAIA低敏感性小鼠:C57BL/6或C57BL/6背景基因构建小鼠
- 多种规格,满足客户的不同需要;
- CAIA成模周期短,只需24-48h就可诱导出严重风湿型关节炎;
- 对DBA/1andBalb/c小鼠,仅用单克隆抗体混合物诱导即可快速建模成功;
- 提升了在各种小鼠中高效诱导关节炎的持续性、稳定性,甚至在CAIA低应答性的C57BL/6小鼠,以及转基因改造或难以预测具体基因敲除的C57BL/6(H-2b)或129/Sv(H-2b)小鼠中都成功建模。
(一)联合使用单克隆抗体混合物和LPS来诱导CAIA敏感性小鼠关节炎((DBA/1,Balb/c,B10.RIII,C.B-17,scid/scid,or129/Sv))
第0天:静脉或腹腔注射1.5mg的5-克隆混合物
第3天:腹腔注射25-50ug的LPS
注意:在3-4天时可以观察到关节炎由温和至严重,7-10天时达到最严重。
(二)联合使用单克隆抗体混合物和LPS来诱导低反应性小鼠关节炎((C57BL/6orC57BL/6background)
第0天:静脉或腹腔注射5mg的5-克隆混合物
第3天:腹腔注射25-50ug的LPS
注意:在3-4天时可以观察到关节炎由温和至严重,7-10天时达到最严重。可在10-14天时再次注射LPS再次刺激炎症关节炎。
(三)利用单克隆抗体混合物诱导DBA/1andBalb/c小鼠关节炎
第0天:静脉注射6-10mg的5-克隆单克隆抗体
注意:在2-3天时可观察到关节炎。此种方法在其他的CAIA敏感性小鼠中还没有得到验证。
小鼠对单抗混合物和LPS的易感性受品系、饲养条件、个体差异及动物的处理和生存环境等影响。建议SPF级条件,因为传统条件时,细菌污染可能使动物产生免疫反应,只产生轻微的关节炎。建议在大规模实验前,先用小样本量做初步研究。研究者应根据自身实验需求,选用最合适的免疫程序。
产品规格/价格
1)YoshinoS.etal.J.ImmunolMethods343:49-55(2009)
2)TeratoK.etal.Autoimmunity22:137-147(1995)
3)TeratoK.etal.J.Immunol.148:2103-2108(1992)
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