相关文章
- 什么是氧化产物什么是还原产物_答案 刷刷题
- lol宝箱怎么升级 lol宝箱升级活动网址_特玩网LOL英雄...
- 低温恒温槽_数控超级恒温槽宁波新芝生物科技股份有限公司
- 窦性心律ⅡⅢavF呈Rs型V6_有问必答_寻医问药网
- 大分子物质的水解实验——油脂水解试验 分析行业新闻
- separate coaxial cavity是什么意思_s...
- 如何选择ELISA试剂？
- ICH溶剂残留指标
- DualColorELISPOTAssayfortheSim...
- STM57一体化闭环步进电机485接口集成IO绝对值编码器淘...
- 五种核苷酸是哪五种
- Nacalai Tesque 品牌介绍及代理商/经销商名单品...
促销商品
最新问答
- [10-03]核糖核酸RNA
- [10-03]核苷类药物知多少– 960
- [11-09]分子生物英文原版书籍Single Nucleotide Polymorphisms Methods ...
- [06-20]治疗用单链寡核苷酸药物的非临床研究评价概述
- [03-10]5核苷酸酶
- [11-20]南京迅贝生物科技有限公司
- [04-18]40bp寡核苷酸连接如何连接到载体上?_问答详情_核苷酸_生物分子_...
- [10-15]反义寡核苷酸的合成与修饰
- [03-04]【转帖】核苷酸类药物治疗乙肝:小心范可尼综合征 感染 论 ...
精选品牌
热卖商品
科莱恩化工(中国)有限公司 Clariant Chemicals (China) Ltd ...
mayitao
/发布时间:1547811066 /浏览量:27
| 实验材料 | 核苷酸 试剂、试剂盒 | SSC焦磷酸钠SDS 仪器、耗材 | 培养箱水浴锅
实验步骤 | 1. 制备双份的转印细菌菌落或噬斑的硝酸纤维素滤膜（处理和干烤过）。 2. 在室温下用3×SDS/0.1%SDS溶液500ml洗膜3~5次。 3. 然后在65℃洗膜至少1.5h以上直至过夜。 4. 在预杂交液中37℃预杂交1h。 5. 在装有20ml以上的SSC杂交液的可封口的杂交袋中可移入多达20张的滤膜。 6. 在毎个杂交袋中每毫升杂交液加入0.125ng至1.0ng的每种32P标记的寡核苷酸。 7. 在以下给定的温度条件下寡核苷酸杂交14~48h。 （1）14碱基——室温 （2）17碱基——37℃ （3）20碱基——42℃ （4）23碱基——48℃ 8. 从杂交袋中取出滤胰，用6×SSC/0.05%焦磷酸盐洗膜液在室温冼膜3~5次，每次5~15min。 9. 再用预热的洗膜液洗膜30min。预热温度与寡核苷酸片段长度有关。 （1）14碱基——37℃ （2）17碱基——48℃ （3）20碱基——55℃ （4）23碱基——60℃ 10. 如果滤膜高于本底放射性活性，则需要将洗膜温度升高2~3℃，并延长洗膜15~30min。 11. 重新作放射自显影检测。但不得超过以下对应的温度： （1）14碱基——41℃ （2）17碱基——53℃ （3）20碱基——63℃ （4）23碱基——70℃ 12. 用塑料薄膜包裹滤膜，放好，使用增感屏在-70℃对X光片曝光14~72h，双份滤膜均对X光片曝光，如果在同一位置出现曝光点，那么该位置对应的细菌菌落或噬斑为阳性。
================ 蚂蚁淘在线 ================ 免责声明：本文仅代表作者个人观点，与本网无关。其创作性以及文中陈述文字和内容未经本站证实，对本文以及其中全部或者部分内容、文字的真实性、完整性、及时性本站不做任何保证或承诺，请读者仅作参考，并请自行核实相关内容 版权声明：未经蚂蚁淘在线授权不得转载、摘编或利用其他方式使用上述作品。已经经本网授权使用作品的，应该授权范围内使用，并注明“来源：蚂蚁淘在线”。违反上述声明者，本网将追究其相关法律责任。 相关阅读
|
|---|
