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人5核苷酸酶(5-NT)酶联免疫分析试剂盒免费代测全国包邮、发货及时、质量可靠、价格优惠、灵敏度高、效果稳定、实验效果好,凡购买公司ELISA试剂盒提供免费代测服务,提供一系列实验技术指导及全方位的售前售中售后服务。英文名称:5nucleotidase(5-NT)ELISAKit产品别名:人5核苷酸酶(5-NT)酶联免疫分析试剂盒规格:48T/96T。
产品名称:人5核苷酸酶(5-NT)酶联免疫分析试剂盒免费代测
英文名称:5nucleotidase(5-NT)ELISAKit
产品规格:96T/48T(两种规格)
检测方法:酶免法/酶联免疫法(ELISA)
保存条件:2-8℃
产品性状:液体盒装
产品价格:含税含运费,我们全程提供ELISA实验技术指导和ELISA试剂盒免费代测。
人5核苷酸酶(5-NT)酶联免疫分析试剂盒免费代测技术交流:双抗体夹心法(检测未知抗原)
间接法(检测未知抗体)
1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次。
2、加样:加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
3、加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。
4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。
5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。1、用包被缓冲液将已知抗原稀释至1-10ug/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。
2、加样:加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)
3、加酶标抗体:于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.05ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,zui后一遍用DDW洗涤。
4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。
5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。服务:
我们可以根据您的应用需要,比如在检测范围、种属以及灵敏度等方面有特殊要求,而量身定制检测试剂盒,有效控制检测试剂成本。并可提供免费代测。人5核苷酸酶(5-NT)酶联免疫分析试剂盒免费代测操作步骤:
1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在*、第二孔中分别加标准品100μl,然后在*、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从*孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
亚油酸LinoleicacidMD55-3.5透析袋(半周长55mm,直径35mm,截留分子量3500Da)5米/卷0
211677-500GPeptone蛋白胨73049-73-7500g
6XDNALoadingBuffer1ml*10
Lincomycin,xy7nochloride5g
荧光素FluoresceinAR25gLM0004φ13混合纤维素酯微孔滤膜0.22um85
M0670-500GMOPS3-(N-吗非林)乙磺酸
BromocresolGreen,FreeAcid25g
胸腺嘧啶脱氧核苷1g
Anti-InflammatoryPeptide2His-Asp-Met-Asn-Lys-Val-Leu-Asp-LeuAnti-InflammatoryPeptide3Met-Gln-Met-Asn-Lys-Val-Leu-Asp-Ser
Anti-KentsinThr-Arg-Lys-Arg
AntioxidantpeptideAPro-His-Cys-Lys-Arg-Met
SELPOthersCynomolgus食蟹猴/恒河猴SELP/selectinP/P-selectin人细胞裂解液(阳性对照)人肺泡上皮细胞cDNAHPAEpiCcDNA
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-D3
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B1胰蛋白酶-EDTA(含10mL酶解缓冲液)1mL
MCF-7(MCF7)(ATCC来源),人癌细胞Human
CHST15OthersHuman人CHST15/BRAG人细胞裂解液(阳性对照)
MRC-5(人胚肺成纤维细胞)5×106cells/瓶×2人前列腺癌细胞;LNCaP
SELPOthersMouse小鼠SELP/selectinP/P-selectin人细胞裂解液(阳性对照)
HuH7-HCV细胞,人感染HCV肝癌细胞小鼠癌高转移细胞,MA-891细胞SV40转化的非洲绿猴肾细胞;COS-7
前脂肪细胞分化生长添加物PAdDS
PromocellC-23130FibroblastGrowthMedium3KIT,成纤维细胞生长培养基3型套装500ml
人5核苷酸酶(5-NT)酶联免疫分析试剂盒免费代测人肺泡上皮细胞cDNAHPAEpiCcDNASELPOthersCynomolgus食蟹猴/恒河猴SELP/selectinP/P-selectin人细胞裂解液(阳性对照)
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-D3
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B1胰蛋白酶-EDTA(含10mL酶解缓冲液)1mL
MCF-7(MCF7)(ATCC来源),人癌细胞Human
CHST15OthersHuman人CHST15/BRAG人细胞裂解液(阳性对照)
温馨提示:使用前,请彻底阅读说明书。本酶联免疫试剂盒是基于经典酶联夹心技术原理,只能用于研究用途,不得用于医学诊断。
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