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| 实验方法原理 | |||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 实验材料 | DNA 试剂、试剂盒 | TEMEDSDSTBE 仪器、耗材 | 烧杯电泳仪
实验步骤 | 1. 按基本方案步骤1~5组装凝胶平板夹层。 2. 在2个100ml烧杯中,配制缓冲液梯度凝胶溶液:50ml用0.5×TBE配制,25ml用2.5×TBE配制,在50℃以下加热至固体完全溶解,冷却至室温,加人20μlTEMED和200μl10%SDS过硫酸氨于0.5×TBE/凝胶溶液,轻轻混匀。加入10μlTEMED及100μl10%过硫酸铵于2.5×TBE/凝胶溶液中轻轻混匀。 3. 用23ml带橡皮吸球的吸管,吸出12.5ml清亮的0.5×TBE/凝胶溶液,接着吸出12.5ml2.5×TBE/凝胶溶液,可通过轻轻挤压橡皮吸球以引进3~4个气泡。 4. 缓缓平稳地将溶液注入胶模的夹层,接着用同一吸管,加入剩余的0.5×TBE凝胶溶液。如基本方案步骤8~10,插入梳子,安装夹子,观察凝胶的聚合。 5. 按基本方案步骤11~33电泳及处理凝胶。
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