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裂解液配方：
尿素7M
硫脲2M
CHAPS4%
二次水至20ml
使用前加DTT至65mM，tris至40mM，PMSF至1mM
上样液配方：
尿素8M
CHAPS2%
1%溴酚蓝0.002%
二次水至10ml
使用前加DTT至18mM，IPGbuffer至0.5%
由于都含有尿素，特别难溶解，好像含有尿素的温度不能超过37度，就在磁力搅拌器上一直搅着，发现过了一两个小时还没溶解，怎么回事么？中间还在34度左右水浴锅里水浴过，还是没溶解，溅在烧杯壁上的液体都已经结晶了。
有人碰到这样的问题么，很着急，急求帮助。
1.裂解液和上样液配方有无问题？
2.尿素怎么老不容，有没有什么方法加速其溶解？
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回复：时间：2012-09-09
你配多少裂解液啊？用烧杯配的吗？如果是的话的确有点难溶解，我们一般都是用离心管配的，比如配1ml，那么把所有药品及buffer称好加好后再加水（大约加0.55ml水），然后把管子盖紧，任意混合摇匀即可，一般过5分钟左右就可以了，如果你配5ml的话，可以用5ml的离心管或者其它管子，
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回复：时间：2012-09-08
顺便再问个问题，我的bradford工作液：95%乙醇25ml85%磷酸50ml考马斯亮蓝G2500.05g二次水至500ml发现怎么的都会有一些考马斯亮蓝G250的小颗粒不能溶解，最后用0.45um滤膜过滤了，这样可以么？会影响测定时的吸光值么？
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回复：时间：2012-09-02
展开引用gaogaoaixuefei顺便再问个问题，我的bradford工作液：95%乙醇25ml85%磷酸50ml考马斯亮蓝G2500.05g二次水至500ml发现怎么的都会有一些考马斯亮蓝G250的小颗粒不能溶解，最后用0.45um滤膜过滤了，这样可以么？会影响测定时的吸光值么？......正常的，不必在意
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回复：时间：2012-09-12
过滤就可以了，有的时候尿素质量不好，我也遇到过，同样的浓度，同一家买的尿素，第一瓶就很好溶解，可是我用第二瓶的时候就特别不好溶解，浑浊的也不是沉淀，就是乳白色，然后我过滤后用的，第三瓶同样的浓度就又没事了，澄清的，不知道你是不是遇到不好的尿素什么的了
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回复：时间：2012-09-09
我也是配的10ml的，用的是40ml的离心管，好像是4.8g尿素吧？反正把所有药品都称好，大概加5-6ml水溶解，只要在振荡器上震荡一会就好了，溶了之后差不多就10ml左右再定容。我用的尿素级别也不高的，就是生工的。
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