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江苏省无锡市2019届高三第一次模拟考试生物试卷(有答案)

mayitao /发布时间:1516809600 /浏览量:36

2017年已结束

这一年里

你一共有299天来了实验室

你喜欢在下午和晚上做实验

你热衷的实验谜雾重重

你习惯默默做实验

却很少输出自己的实验成果......

我的实验日记

2017，

实验记录本里用到的较多的词是“载体构建又失败”、“假阳性”、“没长斑”......

构建载体没有合适的限制性内切酶，怎么办？

我有4个片段要连接到载体上，一次又一次，杀了我吧？

好不容易连上了，序列连接反了是什么鬼？

构建个载体动辄三四天！啊，让我回家吧！我要回去找**！

8月8日大概是很特别的一天

这一天里

我一共在12块板子上面挑了60个菌斑

无一例外，全是假阳性

12月24日

这一天我睡得很晚

23时30分还守在电泳槽旁

期待今晚是个平安夜

然而那一晚我的胶图上除了Marker什么都没有

这一年

我有150天都在构建载体

在所有的实验中

我对这个实验最专一，可就是不成功

时光中的实验室

是不散的宴席

我们错过了你的2017，让你走了那么多弯路，

2018，请让诺唯赞无缝克隆试剂陪伴你！

诺唯赞最新推出的ClonExpress®UltraOneStepCloningKit是新一代的重组克隆试剂盒，可用于单个片段和多个片段的重组连接，不受酶切位点限制。

快速5-15min快速完成重组；

简单一管式Mix，操作简便；

高效高效克隆50bp～10kb片段，阳性率>95%；

兼容单片段、多片段、入门克隆三合一；

零背景提供零背景、Amp+/Kan+双抗性载体。

引物设计

设计带有同源序列的引物。

CEDesign：“我是专门设计引物的软件，看我看我看我”

PCR扩增插入片段

用设计的带有同源序列的引物扩增插入片段，使得最终的目的产物带有和载体末端同源的序列。

Phanta高保真酶：“我是的保真度是taq酶的53倍，选我选我选我”

线性化载体

选择合适的克隆位点，对载体进行线性化

酶切和PCR：“我们都可以喔，任君挑选喔(✿◡‿◡)”

重组反应5-15min

按比例混合线性化载体和插入片段

载体和插入片段：“一见钟情，5min牵手成功”

转化

将重组产物直接转化后涂平板，挑取克隆进行阳性鉴定

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CEDesign：“报告小编，我要给自己加戏，你们知道是引物设计的神器嘛，分分钟设计好引物不是梦，一起躁起来。

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