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几种表达载体
2017-11-10
表达载体四部分：目的基因、启动子、终止子、标记基因 　　常用细菌质粒进行构建，构建过程中运用限制性核酸内切酶切割出与目的基因相合的末端（多为黏性末端，也有平末端），采用DNA连接酶连接，导入生物体实现表达。标记基因可帮助识别质粒并检测是否成功整合到染色体DNA中。　　表达载体（Expression vectors）就是在克隆载体基本骨架的基础上增加表达元件（如启动子、RBS、终止子等），是目的基因能够表达的载体。如表达载体pKK223-3是一个具有典型表达结构的大肠杆菌表达载体。其基本骨架为来自........
【求助】正义、反义真核表达载体? 核酸基因技术论坛
▇爱新觉罗▇厐2017-11-07
表达载体构建正义和反义,一般用于基因功能的研究,正义为强势表达(forced expression)或过表达(overexpression),以观察基因表型,反义则是用来抑制基因表达,以观察在目的基因的表达受到抑制的情况下表型的变化.....
【求助】:有关shRNA的瞬时和稳定转染的疑问 核酸基因技术...
拉菲1襈p2017-11-07
近年来的研究发现，一些小的双链RNA可以通过促使mRNA降解，高效、特异的阻断体内特定基因表达。称为RNA干扰（RNA interference，RNAi）。由于RNAi可以作为一种简单有效的代替基因敲除的工具，在功能基因组学研究、基因治疗等领域得到了越来越多的重视。为此被Science评为2001年最重要成果之一。RNAi，即引入双链RNA，通过特异性结合互补链从而抑制基因表达/引发转录后沉默。许多的研究人员开始用RNAi作为一种工具研究基因功能。较早的哺乳动物RNAi实验中，siRNAs通过........
如何预测和鉴定miRNA的靶基因?
Bsvn丶鼬ゅ2017-11-07
免疫沉淀当然，确定miRNA与mRNA之间的互作，我们还有更直接的方法，那就是从实验上寻找物理相互作用。我们可以利用RNA诱导沉默复合物（RISC）中的Argonaut（AGO）蛋白的抗体进行免疫共沉淀（co-IP）。生物通 www.ebiotrade.com 目前更先进的方法是通过紫外线照射以交联复合物，然后开展深度测序以鉴定发现的RNA，这种方法被称为紫外交联免疫沉淀结合高通量测序（HITS-CLIP），或CLIP-seq。利用这种方法来寻找miRNA的靶基因，能够明显降低miRNA结合位点........
基因工程(基因工程的基本条件载体系统)
爽场司马1262017-11-06
A、目的基因、限制性核酸内切酶、运载体是基因工程必需具备的条件，但体细胞不一定是受体细胞，A错误； B、重组DNA是由目的基因和质粒重组形成的，RNA聚合酶是转录需要的酶，细胞中具有该种酶，因此不是基因工程必需的条件，B错误； C、mRNA是基因转录的产物，基因工程中不需要提供该物质，质粒是运载体中的一种，除了质粒还有动植物病毒和噬菌体衍生物，因此质粒不是基因工程中必须的，C错误； D、限制酶和DNA连接酶属于工具酶，另外运载体、目的基因和受体细胞是基因工程中的必需具备的条件，D正确．故选：D．.....
【求助】关于构建目的基因启动子序列的虫荧光素酶报告基因重组质粒的...
█绪凡█2832017-11-05
目的基因启动子能启动报告基因启动子是RNA聚合酶能够识别并与之结合,从而起始基因转录的一段DNA序列,通常位于基因上游.一个典型的启 动子包括CAAT-box和TATA-box,它们分别依赖DNA的RNA聚合酶的识别和结合位点,一般位于转录起始位点上游几十个碱基处.在核心启动子上 游通常会有一些特殊的DNA序列,即顺式作用元件,转录因子与之结合从而激活或抑制基因的转录.一旦RNA聚合酶定位并结合在启动子上即可 启动基因转录,因此启动子是基因表达调控的重要元件,它与RNA聚合酶及其他蛋白辅助因子等........
乳酸菌食品级表达载体分泌型质粒图谱乳酸杆菌菌株pNZ8148,NZ9000
超超超级棒992017-04-02
本人是哈尔滨工业大学博三博士一枚，急需乳酸菌表达载体pNZ8148质粒，毕业需要呀！哪位大神有这个质粒，我可以跟你换，我们也有很多质粒，pMG36c、pMG36e、pGhost9等等质粒或者菌种，都可以交换！希望有这个质粒的朋友尽快联系我！！！.....
sprE基因敲除粪肠球菌突变株的构建和功能的初步研究
kajunin2015-08-10
各位，最近正在做屎肠球菌某个基因的敲除工作，但是不知道如何构建适用于屎肠球菌进行基因重组的重组载体,实验一直停滞，望各位好人不吝赐教！！！.....
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