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蚂蚁淘
/发布时间:1545758620 /浏览量:63
HahnLab lastmodified 1.Inmicrofugetubes,spindown0.1mlofuninducedcellsgrowntonearsaturationor0.15mlofIPTGinducedcells.RemoveYT(orLB)mediawithapipetmanordrawnoutpasteurPipetteandfreezecellpelletsforlateranalysis. 2.Add120microliters1XSDSPAGEloADIngbuffertocellpelletandvortexuntilcellsareresUSPended. 3.Boilcells5mininH2Obathorheat5minin95degreeheatingblock. 4.Spintubesinmicrofugefor5minutes. 5.Load6-10microliterstoNovexNuPAGEgelsandstainwithcommassieblue.Note:BoiledcellscanbeviscousduetothecellularDNA.Ifveryviscous(hardtoloadongel),trytopipettheSDSPAGEloadingbufferfromaregionofthetubewithalowviscosity. NuPAGEloadingbuffer(120microliters):30microliters4XNuPAGEloadingbuffer(heatinwarmH2Oforafewminutes)60microliters0.1MDTT(16mg/ml)30microlitersH2O1XSDSPAGEloadingbuffer
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