用途和特点：
该试剂盒是利用Klenow的5’-3’的聚合性能，随机引物和同位素[a-32P],[a-35S],[a-3H]dCTP或dATP标记DNA片段，探针。
参数：
同位素可以选用[a-32P],[a-35S],[a-3H]dCTP或dATP；用时15分钟。
组成：
RandomPrimer(9mer),3XdNTPmin(dCTPminus),3XdNTPmin(dATPminus),10XKlenowBuffer,KlenowDNAPolymerase,Protocol.

制品说明 Random Primer Labeling Kit是利用 [a-32P]、[a-35S]或[3H]dCTP标记DNA，制备具有高比活性的杂交用DNA探针的试剂盒。本试剂盒的设计以Feinberg和Vogelstein法为基础并对其进行了改进，利用9个碱基的随机寡聚核苷酸引物以及E. coli DNA Polymerase I 的 Exonuclease-free Klenow Fragment，在短时间内 (10分钟) 就能得到比活性为1×109 dpm/mg的探针 (图1)。  

图1使用RandomPrimerLabelingKitVer.2.0反应时间与探针比活性关系

(TemplateDNA:�-HindIII25ng)

利用随机引物标记试剂盒(RandomPrimerLabelingKit)做DNA标记的原理

利用杂交法检定具有特异序列的DNA或RNA时，必须使用高比放射活性的DNA探针。一直以来制作DNA探针的方法主要是切口平移法(NickTranslation)，但这种方法具有以下缺点：

放射性物质的掺入率较低。

长时间反应后在DNAPolymeraseI的外切酶活性的作用下，将已经掺入的放射性物质

游离出来，从而降低了掺入率。必须有高纯度的模板DNA。

反应后必须除去未反应的放射性dNTP。

1983年Feinberg,A.P和Vogelstein,B.发表了利用随机引物（RandomPrimer）和Exo-freeKlenowFragment进行DNA标记的方法。此方法克服了以上缺点，原理如图2所示。首先通过热变性使模板DNA变为单链DNA，然后随机引物与单链DNA退火，再利用Exo-freeKlenowFragment合成互补链。此时如果底物中dNTP的一种或几种被[a-32P],[a-35S],[3H]等标记时，那么合成的互补链DNA也被标记。合成后的双链DNA通过热变性变成单链后即可用作杂交探针。

表1DNA标记法比较

图2利用随机引物进行DNA标记的原理

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