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| 实验方法原理 | 莽草酸:NADPH+3-氧化还原酶。 3-脱氢莽草酸+NADPH+H+→莽草酸+NADP+ 测定逆反应。 | ||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 实验材料 | 莽草酸脱氢酶稀释溶液 试剂、试剂盒 | 莽草酸碳酸钠NADP 仪器、耗材 | 分光光度计
实验步骤 | 实验所需「试剂」具体见「其他」 0.98ml实验混合物
0.02ml酶稀释溶液 25℃时,于340mn处吸收值降低。NADPH的吸收系数ε340=6.3×103l/(mol·cm)。 注意事项 | 其他 | 试剂 0.1mol/L碳酸钠,pH10.6[Na2CO3,Mr=106;10.6g/L,用0.1mol/L(约8.4g/L)NaHCO3调节pH至10.6] 0.1mol/L莽草酸(Mr=174.2;174mg溶于10mlH2O) 0.1mol/LNADP(Mr=787.4;二钠盐,787mg溶于10mlH2O)
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