乙酰胆碱酯酶染色液(铅铜硫胆碱法)

胆碱酯酶(cholinesterase)属于特异性酯酶,可分为两大类。一类是乙酰胆碱酯酶(Acetylcholinesterase,AChE)又称为真性胆碱酯酶,能水解乙酰胆碱,起到生理的调节作用;另一类为胆碱酯酶,又称假性胆碱酯酶(Pseudocholinesterase,PsChE),能水解胆碱的酯而不能水解乙酰胆碱酯。 乙酰胆碱酯酶主要存在于神经元的胞质内、神经与肌肉接头处即所谓运动终板处;PsChE主要存在于血浆、胰腺、唾液腺内,生理功能尚不明确。显示乙酰胆碱酯酶的方法有Koell法、Snell和Garrett法、Karnovsky和Roots法等。乙酰胆碱酯酶染色液(铅铜硫胆碱法)染色原理是乙酰胆碱酯酶水解碘化乙酰硫代胆碱,释放乙酸和硫代胆碱,磷酸盐与铅离子形成磷酸铅沉淀,再被S2+置换,形成硫化铅沉淀。其优点是操作简便、酯酶的扩散较少,其缺点是对底物对组织的渗透性较差,有可能出现假阳性。 产品组成[1] 操作步骤[1] 1、冰冻切片,厚6 m,不固定或置于遇冷的10%甲醛钙固定。 2、蒸馏水洗。 3、配制AChE孵育液:临用前,取A2加入至A1中,使后者完全溶解,即为A12混合液,4℃保存。取适量的A12混合液、A3、A4、A5、A6,按A12混合液:A3:A4:A5:A6充分混合,即为AChE孵育液,6h内使用。注意:如果想显示AChE和ChE,即无需区分AChE和ChE,无需加入Iso-OMPA。 4、切片入预温的乙酰胆碱酯酶染色液(铅铜硫胆碱法)孵育液中,避光孵育(一般不超过6h),至切片呈淡棕色时取出。 5、蒸馏水洗,镜下观察如活性部位仍较淡,可于蒸馏水洗后再进行孵育,至反应合适为止。 6、流水冲洗5min。 7、滴加Leagene苏木素染色液浅染细胞核。 8、流水冲洗。 9、常规脱水、透明,中性树胶封固。 注意事项[1] 乙酰胆碱酯酶染色液(铅铜硫胆碱法)适用于冰冻切片,同时应减少切片在室温暴露的时间。 主要参考资料 [1]乙酰胆碱酯酶染色液(亚铁氰化铜法)操作说明 ChemicalBook平台所发布的新闻资讯只作为知识提供,仅供各位业内人士参考和交流,不对其精确性及完整性做出保证。您不应以此取代自己的独立判断,因此任何信息所生之风险应自行承担,与ChemicalBook无关。如有侵权,请联系我们删除! 欢迎您浏览更多关于乙酰胆碱酯酶染色液(铅铜硫胆碱法)的相关新闻资讯信息乙酰胆碱酯酶染色液(铅铜硫胆碱法)的染色原理和操作 [2020/04/27]

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