2021-08-04多肽的KLH耦联是怎么回事？

KLH是分子量十分巨大的蛋白，有几百万Da，所以在KLH分子表面有大量的活性基团，最常用于偶联的是伯胺基团。小的多肽通常也带有不同基团可以用于偶联，常用的有伯胺基团，羧基和巯基。多肽与KLH的偶联就是利用这些基团，再通过交联剂（crosslinker），将多肽上的巯基/羧基/伯胺与KLH上的伯胺相连，从而形成共价偶联，制备成完全抗原，用于免疫动物获得抗体。所以偶联的伯胺应该是来自于赖氨酸侧链和N端，而偶联的羧基则来自于天冬氨酸，谷氨酸和C端，巯基则来自于半胱氨酸。至于偶联上去的数量，和加入的肽段，交联剂，KLH的摩尔比例有关。通常一分子KLH上可能会偶联上百个肽段。