BUCCALCELLDNAPREPS

Important:ExtracttheDNAwithinoneweekofreceivingsamples.Samplesthathavebeenprocessedshouldbefrozentopreventdegradation.Freezesamplesbetweenuseeachday.

1.Add600mlof50mMNaOHtoa1.5mlEppendorftubeandinsertbrushintube.(Clipoffhandleofbrushwithwirecutterssotubecanbeclosed.CuttersshouldberinsedwithEtOHbetweensamplestopreventcontamination.)

2.Vortexthoroughlytomix,foratleast10s.

3.Heatto95∫Cfor5min.

4.Spinbrieflytopoolcondensation.

5.Removebrushwithtweezers(tweezersshouldberinsedwithethanolbetweensamplestopreventcontamination)andadd60ml1MTrispH8.0totube.Vortextomixforatleast10s.

6.Spinfor1minuteat13,000rpmanddecantsupernatanttoacleanstoragetube.

7.Use2-5mlofsupernatantforstandardPCR.

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