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如何正确的选择Flag标签抗体?
血刃乌鸦f232021-08-16
Flag标签系统是已被公认的用于表达、纯化以及检测融合蛋白的表达系统,广泛应用于Western blotting、免疫细胞组化、免疫共沉淀、流式细胞术、蛋白纯化以及蛋白相互作用、蛋白分离等多个研究领域。选择Flag标签抗体,主要根据实验的需要。一个抗体检测后应用类型越多,使用中选择余地就越大。要综合考虑抗体来源,特异性,稳定性,效价等等因素.....
6*his标签抗体做western难度怎么样
坏99庇步82021-08-15
这个怎么说呢。不管是什么样的抗体,做Western因为操作步骤都一样所以操作的难度都差不多。但是His标签是目前最普及最方便的融合标签,所以His标签的抗体,不管是单抗还是多抗,鼠源还是兔源都是商品化程度非常高的的抗体。这样的话因为抗体原因失败的可能性就非常小了。.....
为什么构建的过表达植株不表达目的蛋白 核酸基因技术讨论版...
arieswei4309202021-08-14
最近在构建一个过表达质粒,载体是pef-flag。基因测序是完全正确,WB检测有flag的条带,但是用内源性抗体杂空载和过表达的变化基本没有,所以这个是否已经过表达了?坛友们是否遇到过这种情况?.....
【求助】western检测不到加在目的蛋白C端的Flag标签!!! 蛋白质和...
小晴12132021-08-13
用目的蛋白的单抗就能检测到,请问你是怎么解决这个问题的呢?.....
His标签蛋白纯化常见问题解答 产品FAQ 北京全式金生物(...
darknesskou2021-08-12
如题...通过转染带HIS标签的外源性ROCK2到G2细胞中然后用HIS抗体+磁珠去拉ROCK2蛋白...为什么会得到一条240KD的肌球蛋白的重链...困惑中!求指点!!!!!!!!!!!!!!!.....
标签抗体产品金斯瑞生物
008zLm2021-08-11
标签抗体,别名为抗原表位,又称抗原决定簇,是抗原分子中决定抗原特异性的特殊区域或基团,是与抗体特异性结合的结构或序列。向左转|向右转.....
植物转基因是否一定得加标签? 标签会不会对蛋白有影响?
妙妙618yYy2021-08-10
并不是必须的,加标签一个重要原因就是方便在蛋白水平检测目的基因表达。如果目的基因编码蛋白有现成的抗体,就不用加标签,如果没有现成的抗体,加上标签后就可以用与目的基因融合的标签蛋白抗体检测目的蛋白表达,不需要再合成目的蛋白的抗体,方便且廉价。标签一般都是经过广泛使用的,如果有问题就不会一直被使用了。.....
His标签单抗
jerrywang742021-08-09
小弟我最近在做Western,目的蛋白是一个加了6×His和Flag标签的融合蛋白,不过实验室还存有Anti-His抗体(并不是Anti-6×His抗体),就拿这个抗体跑了WB,但是内参什么的都很好,目的条带出不来,不知道是不是与一抗有关。另外质粒转染细胞应该也没问题,设的阳性对照pGFP转染的荧光量很高(转染效率在90%左右),所以理论上讲蛋白表达和提取没有问题。在这里先谢过!.....
几种常用的蛋白标签的功能和优点
幽蕠2021-08-07
标签蛋白抗体是一类经过亲和纯化的小鼠单克隆抗体。用于检测各种商品化表达载体上的标签序列(如:MyC、His、GST、HA等),籍以分析检目的蛋白的表达含量及其功能。其原理是抗原—抗体反应,这些标签抗体可以高度特异地结合对应的标签融合蛋白。标签抗体是开展基因蛋白表达、信号转导和基因功能研究的常用工具。百度上的,,,,,搬运.....
免疫分析中常用的荧光染料与标记染色
杜哥4Pp2021-08-06
免疫组化是化学显色不是发光 免疫荧光是通过抗体上标记的荧光基团发光.....
基于无细胞系统的蛋白质芯片技术及其应用
蜜兜2021-08-05
楼主新手,最近在做一个蛋白的抗体,表达了目的蛋白的GST融合蛋白送去免疫兔子,现在收到了返回的抗体,想用His标签的融合蛋白对抗体进行纯化,我只知道Ni柱纯化His标签蛋白的方法,最终是要用咪唑洗下融合蛋白,但是现在想把His标签与Ni柱之间的结合固定,从而纯化洗脱抗体,但是不知道His标签与Ni柱固定的的方法...!!!老板发飙了,小女子**大神指点啊55555.....
碧云天(beyotime)一抗价格采购供应商信息
梓倏谥92021-08-04
做Western blot的单抗和多抗标签并没有什么不同单抗标签选择的一抗范围比较小一些,多抗标签选择的一抗范围可能相对大一些。而商品化二抗基本没什么差别。不管是选择什么样的抗体,在Western blot检测方面都是一样的所以做Western blot的单抗和多抗标签并没有什么不同.....
【求助】pIRES2EGFP载体表达产物可以用GFP标签抗体做wester...
moveleft2021-08-03
如题,最近刚刚构建了pIRES2-EGFP重组质粒,暂没加其他标签,要转染MDCK细胞,1500bp,产物大约57kDa,请问表达产物可以用GFP标签抗体做westernblot鉴定吗?.....
免疫荧光实验步骤
喜洋洋HE05JF2021-08-01
本数据来源于百度地图,最终结果以百度地图最新数据为准。如何根据蛋白的活性部位选择相应的抗体进行免疫荧光实验?Flag标签系统是已被公认的用于表达、纯化以及检测融合蛋白的表达系统,广泛应用于Westernblotting、免疫细胞组化、免疫共沉淀、流式细胞术、蛋白纯化以及蛋白相互作用、蛋白分离等多个研究领域。Flag标签是一个与重组蛋白相融合的由8个亲水氨基酸(Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys)组成的多肽片断。FLAG标签只有8个氨基酸组成,因此它不会占据其他表位与结........
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