良好的病毒抗原片是正确判断染色结果的基础，染色过程中每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果。应注意以下几点：

1.标本的固定方式和温度要正确，同时设立阳性和阴性对照。

2.检查抗体的有效期和保存条件，尤其是标记了酶的抗体，应避免反复冻融，试剂保存时一定要避免与挥发性有机溶剂同放一室，以免降低抗体的效价。检查抗体所使用的稀释度及稀释溶液，一抗的使用浓度过高会使整个切片全都染上了颜色；检查底物溶液是否有效。

3.所有的试剂要按正确的顺序加入，不要忽略了应该加的某种试剂，包括一抗、二抗、三抗及底物等。

4.检查冲洗液是否和反应试剂匹配，溶液的pH值很重要，与过氧化物酶底物匹配的溶液中不应含有叠氮钠。

5.温育的时间要足够，温育时切片要放平，否则会导致抗体流失。

6.清洗要充分。

操作更为方便、简单和经济实用。其与经典ELISA检测的主要区别是：多数采用硝酸纤维膜作为载体，而不是聚苯乙烯微孔反应板；所用酶底物经分解后在局部产生不溶性产物沉淀。