1.取4.5ml大肠杆菌过夜培养液于5ml塑料离心管中，12000r/min离心1～2min，弃上清。

2.将细胞沉淀悬浮于1.7mlTE缓冲液中，加入10%SDS90μl和20mg/ml的蛋白酶K9μl混匀，37℃保湿1h。

3.加入5mol/LNaCl300μl，充分混匀，再加入240μlCTAB/NaCl，混匀，置65℃水浴10min。

4.加入等体积的酚/氯仿/异戊醇（25:24:1）混匀，12000r/min离心5min。

5.将上清水相转入另一洁净的塑料离心管中，加0.6倍体积的异丙醇使DNA沉淀下来。

6.快速离心数秒钟，弃上清，用70%的乙醇淋洗DNA2次，将DNA沉淀经真空干燥后溶于300μlTE缓冲液中。

用此法获得的染色体DNA可用于限制性酶切等分子生物学操作。

7.取少量（约3～5μl）提取的DNA样品（其余置于-20℃保存），加入3μl溴酚蓝加样缓冲液，混匀后上样进行琼脂糖凝胶电泳1～2h。琼脂糖中加有EB，在电泳过程中，EB将插入DNA分子中。

8.戴上一次性塑料手套（EB是强诱变剂）将凝胶取出置于紫外分析仪上观察染色体DNA荧光带。