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常用流动相加酸碱后PH的总结,希望大家能够提供一点自己测过的结果,谢谢先
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回复:时间:2021-08-01
快乐桃花岛 我们常用的色谱柱的PH耐受大概是PH(2-9),最近摸条件,但是PH计坏了,想调一下流动相的PH,苦于PH试纸的不精确性,特此求助:常用流动相加酸碱后PH的总结,希望大家能够提供一点自己测过的结果,谢谢先我们实验室的PH计也坏了,所以我们都用PH试纸调的,不过不是广泛的PH试纸,而是精密PH试纸,1.0~3.0的,3.0~5.0的,还有在碱性区域的,其实效果也不错如果要求不是非常高的话。;)
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回复:时间:2021-07-29
建议自行总结。个人见过许多这样形式的标准:甲醇:水:甲酸(500:500:1)或者,乙腈:0.2%磷酸氢二钠溶液:磷酸(300:700:1)个人很喜欢这种形式的描述的,十分的具有重现性,也好控制。只是需要前期确认好pH的范围而已。
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回复:时间:2021-07-27
展开引用picasso建议自行总结。个人见过许多这样形式的标准:甲醇:水:甲酸(500:500:1)或者,乙腈:0.2%磷酸氢二钠溶液:磷酸(300:700:1)个人很喜欢这种形式的描述的,十分的具有重现性,也好控制。只是需要前期确认好pH的范围而已。......这种配置方法值得学习但是梯度洗脱时就有点困难:)
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回复:时间:2021-07-30
我也来凑两句:1,上学时老师就教导我们流动相的pH值一定要采用pH计进行调节,因为无特殊说明,流动相均默认为用pH计进行调节,也有利于方法的重现性;2,再者,对于加有缓冲盐的流动相,也要看其缓冲能力如何,假设其缓冲范围为4-8,那么如果你需要将流动相的pH值控制在4.5左右(即靠近缓冲能力上下限时),就应该有个比较准确的pH值控制范围,通常需要将其控制在4.5±0.1范围,甚至更小;3,同上,假设缓冲盐的缓冲范围仍为4-8,那么如果你需要将流动相的pH值控制在6左右,通常情况,不需要将其pH范围规定太严格,因为其缓冲能力完全能接收不同pH计所带来的误差,但是实际并不是这样,还得根据所测物质对pH值是否敏感来判断,可以通过调节流动相的pH值±0.5范围进行试验,分两种情况:A,在此范围内如果不影响试验结果,则直接规定pH值=6即可;B,如果在此范围内影响试验结果(比如主峰保留时间变化很大或杂质、空白溶剂、辅料因调整pH值后干扰测定等),也需要对pH值规定一个上下限。4,当然,如果缓冲盐是磷酸盐,那用磷酸来调节pH是比较合适的,如果是别的缓冲盐,常用磷酸、醋酸和三乙胺等来调节;5,如果不是特殊物质,建议还是别将pH值调至太低,虽然有时候pH值调至偏酸(比如2.5)或偏碱(比如7.5)会很容易达到你所想要的目的,但是对于一般的色谱柱损害是相当大的,不建议这样做。
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回复:时间:2021-07-29
根据实验需要,应用酸主要有一是在离子抑制RP-HPLC中,可以有改变蜂型和调整分离度的作用的;二是增强灵敏度的作用,当然一般醋酸的含量要小于1%的,其实其中甲酸的使用不如醋酸和TFA广泛,特别在LCMS中经常使用TFA来增强灵敏度。(TFAFix)常用的量一般在0.1%左右,非挥发性的酸、碱是不能用在LCMS中的,如果TFA不适用的话,也经常用甲酸代替TFA。当然基本点还是流动相的pH要在柱子的使用范围里。
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回复:时间:2021-07-28
111有点忽悠哦,如果我们都用估计来做的话,还不如去煮茶叶蛋去买算了,想加多少盐就加多少盐,只要不太咸就行了,哎你对上面的讨论有什么不同的见解,可以说出来呀,干嘛装得一副高深莫测的样子?xx(
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回复:时间:2021-07-31
司马长风0.2%甲酸,测得的pH2.5,2%甲酸,测得的pH2.0,2%氨水,pH11.0。记得前面有个版主的帖子,TFA一般柱子能够耐受的浓度也讨论过0.1%TFA的Ph是2.0吗?有没有人测试过?其他浓度呢,0.05%?
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