2021-07-28（求助）如和用高压灭菌锅进行抗原修复

关于修复的方法： 1：热修复 切片在抗原修复液中加热，修复的温度一般是95到97度，维持20分钟，然后自然晾至室温。微波修复也应该把温度控制在上述的温度范围内。2：酶消化修复时，在胰酶溶解液中应添加氯化钙溶液，维持其稳定性。

高压抗原修复的【操作步骤】：1.常规组织切片后经二甲苯脱蜡、梯度乙醇脱水后，浸泡于蒸馏水中待用。2.取一定量的PH值为6.0的枸橼酸缓冲液（800-1500ml）于压力锅中，大火加热直至沸腾，将脱蜡水化后的组织切片置于不锈钢或耐高温的的塑料切片架上，放入沸腾的缓冲液中。盖上锅盖，扣上压力阀，继续加热至喷气，即达到工作温度和压力（扣阀至喷气以6min为最佳），开始计时，1-2min后，压力锅离开热源，1min后用自来水淋锅体使之冷却至室温，去阀开盖，取出玻片，先用蒸馏水冲洗两次，之后用PBS（PH值为7.2-7.4）冲洗两次，每次3min。【注意事项】：1.用过的枸橼酸缓冲液必须弃去不得再用。呵呵不必节约。2.玻片必须经过防脱片处理。具体操作论坛中有。3.加热时间非常重要，组织切片加热的总时间以5-8min为宜。时间长会使背景加深。4.压力锅使用后及时清洗，凉干备用。

to 阿荣：你讲的不错啊！！！！

to 阿荣： 我没有接触过高压修复，我有一个问题，抗原修复的目的是使抗原位点充分暴露，如果底片的温度大起大落的话，肯定要影响修复效果，可是上面你提到的方法中，其温差很大的，这是我不明白的，能不能再解释一下。不知道用这种方法修复的切片与用普通热修复的结果那一个好一点。

加热修复的方法可分为:高压法、微波法、水浴法三种，实验证实，高压抗原修复法在染色强度和重复性等方面均优于水浴法和微波法。抗原修复中抗原修复液非常重要，而柠檬酸缓冲液为免疫组化首选和常规使用的抗原修复液。上述高压抗原修复angelxiaohei 应该看到，组织切片要加热5-8min，足可使抗原位点充分暴露了，在修复液的情况下不会影响修复结果的。

斑竹，怎么分数这么难得啊？一分也没有啊？

rstar1978 斑竹，怎么分数这么难得啊？一分也没有啊？不要着急啊，新战友打分从宽，不过也得给我一个时间啊，一般不超过48小时。GOOD LUCK!