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流式细胞仪的工作原理:测量群体中单个细胞经适当染色后其成分所发出的散射光和荧光,在悬液中以单行流过高强度光源的焦点,当每个细胞经过焦点时,发出一束散射光/或荧光。它们经过过滤及光镜系统收集到达一个光电检测器(光电倍增管或一个固态装置),光检测器把散射光定量转化成电信号,经数字转换器进行数字化后而成整数,然后进行电子存储,以后数据可以调出显示和进行分析。
流式细胞仪的应用:
细胞生物学 | 肿瘤学 | 免疫学 | 血液学 | 药物学 |
1、定量分析细胞周期并分选不同细胞周期时相的细胞; | 1、DNA倍体含量测定是鉴别良、恶性肿瘤的特异指标。 2、近年来已应用DNA倍体测定技术,对白血病、淋巴瘤及肺癌、膀胱癌、前列腺癌等多种实体瘤细胞进行探测。 3、用单克降抗体技术清除血液中的肿瘤细胞。 | 1、研究细胞周期或DNA倍体与细胞表面受体及抗原表达的关系; 2、进行免疫活性细胞的分型与纯化; 3、分析淋巴细胞亚群与疾病的关系; 4、免疫缺陷病如艾滋病的诊断; 5、器官移植后的免疫学监测等。 | 1、血液细胞的分类、分型,造血细胞分化的研究,血细胞中各种酶的定量分析,如过氧化物酶、非特异性酯酶等; 2、用NBT及DNA双染色法可研究白血病细胞分化成熟与细胞增殖周期变化的关系,检测母体血液中Rh(+)或抗D抗原阳性细胞,以了解胎儿是否可能因Rh血型不合而发生严重溶血; 3、检测血液中循环免疫复合物可以诊断自身免疫性疾病,如红斑狼疮等。 | 1、检测药物在细胞中的分布,研究药的作用机制,亦可用于筛选新药,如化疗药物对肿瘤的凋亡机制,可通过测DNA凋亡峰,Bcl-2凋亡调节蛋白等。 |
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