- 植物丙二醛(MDA)ELISA试剂盒说明书 分析方法 La...
- SouthernBlotting:DNATransfer
- 基因表达载体构建的方法有哪些 生物科学论坛学术科研...
- pGL3_医药招商网
- ...RNA by agarose–formaldehyde...
- LexA酵母双杂交系统的设计原理 分析行业新闻
- illumina不愧是二代测序无冕之王_shengxinxi...
- 德国BRAND十二通道电子移液器
- 酵母双杂交技术及其在蛋白质组研究中的应用
- KANON / 雪之少女(京都版) (゜゜)つロ 干杯~...
- Viskase透析袋现货实验透析袋价格美国进口透析袋供应供应...
- 酵母双杂交系统原理的二类载体
- [07-26]酵母单杂交文库构建技术服务性能参数,报价/价格,图片
- [10-02]酵母双杂转完质粒的酵母在一缺液体培养基上不长??? 分子生物...
- [10-01]酵母双杂交实验有哪些注意事项? 雨露学习互助
- [10-02]如何设计实验证明一个信号分子的受体是在质膜外表面
- [08-10](完整版)酵母双杂交原理
- [10-02]酵母双杂方法中,接合生殖和共转化哪个更好? 微生物 学术...
- [07-21]大肠杆菌双杂交系统
- [08-16]clontech酵母双杂交Gold系统使用说明书
- [07-29]clontech酵母双杂交 分子生物 生物化学论坛学术科研互动...
以phenol/chloroform 进行DNA 萃取 实验方法
Deproteinationusingphenol/chloroform(Maniatisetal.,1982)
"Phenol"asusedisAnalargrade.Phenolshouldbemeltedat65°C,8-hydroxyquinolineaddedtoafinalconcentrationof0.1%,andequilibratedthreetimeswithanequalvolumeof1MTris.HCl,pH7.0.ThefinalTriswashisreplacedwithTE(10mMTris,1mMEDTA,pH8.0)andthephenolstoredinthedarkat4°C.8-hydroxyquinolineisaddedtopreventoxidationofthephenolandtoactasaninhibitorofRNases.
"Chloroform"asusedisawatersaturated24:1(v/v)mixtureofchloroformandisoamylalcohol.Thepresenceofisoamylalcoholisrequiredtoaidseparationofthetwophasesduringextractionofaqueoussolutionswithchloroform.Phenol:chloroformisa1:1(v/v)mixtureoftheabovetworeagents.
N.B.:Phenolishighlytoxic.Glovesshouldbewornatalltimeswhenhandlingsolutions/mixturescontainingphenol.Chloroformisahepatic(liver)toxinandalcoholisflammable.
Nucleicacidsarepurifiedasfollows:-
1)Addanequalvolumeofphenol:chloroformtothemixturetobecleanedandvortexedtoemulsifythe2phases.
2)Thephasesareseparatedbycentrifugationat13,000rpmfor2minutesinamicrofugeor5minutesat3,000ginaMSECentaurforlargervolumes.
3)Theaqueousupperphaseisremovedtoacleantube,takingcaretoavoidanyinterfacematerial,andtheextractionrepeateduntilnointerfacematerialisvisIBLe.
4)Theaqueousphaseisthenextractedoncewithanequalvolumeofchloroformandthenucleicacidsalcoholprecipitated.
Ifprecipitationisunnecessarytheaqueousphaseisextractedoncewithanequalvolumeofwatersaturateddiethylether.Theupperetherlayerisdiscardedandanyresidualetherisremovedbyheatingthesampleto65°Cfor5minutes.
================ 蚂蚁淘在线 ================
免责声明:本文仅代表作者个人观点,与本网无关。其创作性以及文中陈述文字和内容未经本站证实,对本文以及其中全部或者部分内容、文字的真实性、完整性、及时性本站不做任何保证或承诺,请读者仅作参考,并请自行核实相关内容
版权声明:未经蚂蚁淘在线授权不得转载、摘编或利用其他方式使用上述作品。已经经本网授权使用作品的,应该授权范围内使用,并注明“来源:蚂蚁淘在线”。违反上述声明者,本网将追究其相关法律责任。