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请教各位大咖，冰冻切片做免疫荧光染色二抗如果放37度l小时，切片会不会干掉，细节应该怎么做。如果二抗室温（现在室内13度）1小时够不够，我是二抗室温lh染了2次，都没有满意的荧光。还有病理科的老师说冰冻切片之前不能固定，我是直接新鲜组织OCT包埋后冰冻切片的
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