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2021-07-22EDC活化微球后超声，微球与缓冲液分成

诊断试剂小学生
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像图中所示，我1%的羧基微球用EDC活化，离心后用50Mm、PH7.2的PB缓冲液悬浮，用超声波超声5分钟，然后就分层了，上层是微球。

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相关回复

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回复：时间：2017-02-11

在线等，有同行交流一下不。

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回复：时间：2017-02-16

超声5分钟也太久了吧，微球都聚集了，还有用MES缓冲液比较好

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回复：时间：2017-02-11

加入抗体后，室温孵育3小时，离心后测上清液，抗体包被量能达到0.5mg/ml，可是测试校准品没反应。很是郁闷，快崩溃了。

有用（0）

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回复：时间：2017-02-11

微球聚集后一般是浮在上面的，猜测可能是超声功率不够没超开的缘故

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回复：时间：2017-02-15

超生有分散微球的功能，但是实验过程中不需要超声5min这么长时间会起到反作用的，一般超声十秒就能达到分散的作用了

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回复：时间：2017-02-12

标记时候用的缓冲液有点问题吧，很多公司的微球不能有磷酸盐体系的，而且50mM的PBS离子浓度也太高了。这个肯定有聚集了还有EDC的量也是很容易导致聚集的

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回复：时间：2017-02-17

同意前面的说法，建议试一下一步法包被，EDC活化30分钟后直接加入抗体反应。偶联完成后再离心清洗。超声是需要对粒径检测的情况下适当进行，超到粒径均一即可。

有用（0）

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回复：时间：2017-02-14

5分钟？是不是都要发热了啊，抗体都要失活了

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回复：时间：2017-02-15

我是1min超声分散的

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回复：时间：2017-02-20

应该不是超声问题，你换个缓冲液，比如用100MMMES，还有看看是不是EDC加多了

有用（0）

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回复：时间：2017-02-12

展开引用一盏离愁2190标记时候用的缓冲液有点问题吧，很多公司的微球不能有磷酸盐体系的，而且50mM的PBS离子浓度也太高了。这个肯定有聚集了还有EDC的量也是很容易导致聚集的......能线下交流吗

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