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转染前细胞长到多少比较合适做实验
蘑菇头丌Nj6R2021-08-18
细胞 （英文名：cell）并没有统一的定义，比较普遍的提法是：细胞是生物体基本的结构和功能单位。已知除病毒之外的所有生物均由细胞所组成，但病毒生命活动也必须在细胞中才能体现。一般来说，细菌等绝大部分微生物以及原生动物由一个细胞组成，即单细胞生物，高等植物与高等动物则是多细胞生物。细胞可分为原核细胞、真核细胞两类，但也有人提出应分为三类，即把原属于原核细胞的古核细胞独立出来作为与之并列的一类。研究细胞的学科称为细胞生物学。细胞体形极微，在显微镜下始能窥见，形状多种多样。主要由细胞核与细胞质构成，表........
求助!!吸血虫细胞转染用什么转染试剂转染效率高!!
蓝天98962021-08-17
HAC15细胞转染，目前用的lip3000、lip2000都用过，不知道是试剂剂量使用问题，还是购买试剂问题，荧光显微镜一个视野下好的有几个荧光，有得没荧光，没荧光，没荧光，求HAC15细胞转染用什么转染试剂转染效率高！！！.....
细胞转染为什么不能加血清
驚嘆13312021-08-16
传统的转染试剂有一定的细胞毒性，在转染过程由于提高细胞的通透性因而不能在培养基中添加抗生素。如，阳离子脂质体。带正电的脂质体与核酸带负电的 磷酸基团 形成复合物被细胞内吞。血清中含有大量的蛋白质，在转染过程中，带负电的蛋白质可能干扰阳离子脂质体对核酸的吸附，影响转染效率。另外，使用脂质体等转染 试剂时，由于含血清转染会将血清中的蛋白带入细胞，引发细胞毒性，导致转染效率降低，故不能有血清转染。这些转染试剂要求在转染前换无血清培养基，转染后 4-6h在更换成有血清培养基，这其实是为了减轻转染造成的细........
献给初学者:大神教你瞬时转染快,准,狠_实验方法_
蓝天98962021-08-15
用lip3000转染HAC15细胞，目的把质粒转入细胞，现阶段把带EGFP的质粒转进去就难，荧光显微镜下荧光很少，可以数清，按照lip3000说明书转染的（剂量有适当调整），求转染高手指点方法！！.....
细胞生物学技术细胞转染和传代.pptx
静°14642021-08-14
可以传代。转染分2种，一种是瞬时转染，即转染后让细胞表达目的蛋白后即提取蛋白，提一次蛋白，转染一次，这种方式一般不传代；另一种转染为稳定转染，转染后加入一定选择压力进行筛选，没有转染的细胞不能存活，只留下转染的细胞，这种情况下可以筛选单个转染细胞，构建稳定表达某一特定蛋白或基因的细胞系。.....
[求助]细胞转染,挑单克隆 经验共享 分析测试百科
Tbji丶鼬ゅ2021-08-13
无限稀释法，就是铺到96板的一个孔，然后倍数稀释下去，到最后就会有一个细胞的孔，还有就是细胞计数，然后再铺96孔，也会出现一个细胞，但是对于挑单克隆来说，我觉得没必要单个细胞，单个细胞也不容易长起来，虽然挑克隆可能是混转的，但是不会影响实验需求。大家都是用什么方法挑选细胞单克隆的单克隆：单克隆是指‘子代来源于一个母体.细胞培养：细胞的大规模克隆.细胞培养,既包括微生物细胞的培养,细胞培养技术可以由一个细胞经过大量培养成为简单的单细胞或极少分化的多细胞.单克隆一般常指动植物细胞的克隆,细胞培养一般........
Raw264.7细胞转染求助【细胞生物学吧】
qingwudarao2021-08-11
最近在Raw264.7细胞上进行干扰和用质粒进行过表达实验，脂质体根本转不进去，后来又换了一个国产的转染试剂转染效率也很低，现在考虑用电转。我们实验室有Lonza的电转仪，有没有好一点的电转染试剂或者细胞转染试剂？.....
初次转染,细胞转染效率低怎么办?
齐宗献2021-08-10
本人为新手，希望大家能够直到一下细胞转染效率的问题。现在已知的信息如下：质粒上面包含了萤光虫荧光素酶基因和海参荧光素酶基因，请问我通过什么方法可以测得转染效率？如果不能测得转染效率，请问怎么优化转染条件呢？.....
研究蛋白质与DNA相互作用的主要方法
sen4042021-08-09
细胞转染可以：（1）真核细胞可以掺入外源DNA而获得新的遗传标志；（2）应用于转基因动植物；（3）应用于生物制药、基因治疗、RNA干扰。脂质体介导法实验原理上图所示是脂质体介导转染的示意图，它显示了外源质粒进入细胞的一般过程。外源基因进入细胞主要有四种方法：电击法、磷酸钙法和脂质体介导法和病毒介导法。电击法是在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入；磷酸钙法和脂质体法是利用不同的载体物质携带质粒通过直接穿膜或者膜融合的方法使得外源基因进入细胞；病毒法是利用包装了外源基因的病毒感染细胞的方法使得其........
细胞裂解做western blot的相关问题 实验方法
狗狗乓北252021-08-08
求助!!HAC15细胞转染用什么转染试剂转染效率高!!! 细胞技术讨论...
jiang39672021-08-07
用siRNA转染A375细胞，我看到好多说这个细胞转染效率很低，求转染效率高的转染试剂！！.....
【求助】哪种方法转染293T细胞的效率较高 细胞技术讨论版 ...
加菲9日1512021-08-06
个人经验，BHK、CHO是很常用的转染用细胞，而且跟抗体非特异性反应也不高。一般来说，大多数可传代细胞的转染效率都是可以的，还要考虑所用转染剂的类型。不建议你用MDCK细胞，非常难转染。.....
浅析细胞转染效率低下的原因 生物科学 细胞科学论坛学术...
玛三丽2021-08-05
各位版友求助，我使用Hek293构建转染模型，瞬转5质粒，用lipo2000做转染体系。转染48h，发现荧光较强的细胞都在爬片的边缘，比例十分少。是因为我添加试剂的手法不对吗。同时也发现加入转染体系后细胞状态特别差。想问一下用lipo2000时可以用无双抗的10%FBSDMEM吗。我转染前6h现在用的是纯DMEM，不含FBS。请各位大神帮忙.....
如何实现高效率细胞转染诺为生物是eBioscience, Miltenyi,STEM...
加菲5日3102021-08-04
可以考虑在以下角度进行转染实验的优化：细胞状态与密度；转染试剂的类型、用量；DNA的品质、用量；转染复合物的品质、作用细胞的时间长度。.....
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