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mayitao  /发布时间:1632331802 /浏览量:250   

货号：	CG010
生长状态：	良好
运输方式：	常温
器官来源：	肾
是否是肿瘤细胞：	否
细胞形态：	贴壁
物种来源：	犬
组织来源：	上皮
细胞类型：	贴壁
供应商：	北京英茂盛业
规格：	一瓶

MDCK-EGFP稳转细胞株

 

 

 

货号：CG010 MDCK-EGFP细胞株是用表达EGFP的慢病毒感染MDCK细胞，经嘌呤霉素筛选得到的多克隆细胞株。细胞稳定表达EGFP荧光蛋白，培养时无需抗生素维持。可作为慢病毒感染实验中的对照细胞株使用。

 

 

细胞特性：

细胞来源：MDCK(犬肾细胞）

细胞类型：EGFP稳定过表达多克隆细胞株

表达蛋白：EGFP

构建载体：pLV-EGFP-C（VL3215）

筛选抗生素：嘌呤霉素

培养基：DMEM高糖培养基+10%FBS

 

 

构建方法：

慢病毒载体pLV-EGFP-C包装为慢病毒，转染MDCK细胞，经嘌呤霉素筛选得到稳定表达EGFP荧光蛋白的多克隆细胞株。

 

 

细胞培养方法：

以25cm培养瓶传代为例。

1、传代前将细胞培养液、PBS和胰蛋白酶温浴到37℃。

2、吸去细胞培养液。

3、用PBS漂洗1到2次。

4、加入3ml胰蛋白酶，轻轻晃动细胞瓶，使胰蛋白酶均匀覆盖细胞。吸去胰蛋白酶，将培养瓶放置在细胞培养箱中，37摄氏度消化。由于配制的胰蛋白酶活力有差别，消化时间可用30秒到1分钟。应在倒置显微镜下观察，看到细胞分开及稍微变圆即可。

5、加入5ml细胞培养基，用吸管轻柔吹打分散细胞。

6、按1:3到1:5接种细胞。

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