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question 【求助】请问什么染料比EB敏感。
最近做的实验对跑胶的DNA分辨率要求比较高，所以希望找到一种灵敏度比EB高的染料，在这里询问各位高手，谢谢。
swm 2005-07-13
  • 目前还没有在灵敏度方面能够替代EB的染料！
  • 除了EB,就数放射性同位素比它灵敏了！其他的还未听说！
answer全部回答 （共 3 条）
  • 呵呵，一楼问题中的分辨率其实跟灵敏度还不太相关。想要灵敏度高，可以作银染染，当然是针对 聚丙烯酰氨凝胶电泳，下面是个人总结的快速银染方法，你可以尝试，至少比EB强10倍，染色液：0.1%AgNO3（可配成20%母液）显色液：10gNaOH，0.2gNa2CO3，2ml甲醛，纯水定容至500ml过程：剥离胶，双蒸水冲洗一次，15s，加染色液，闭光轻摇10min，双蒸水冲洗一次，30s，加少量显色液，轻摇15s，弃去反应液，再加入适量显色液，一般2-3min，可出现清楚条带，未出现条带，可延长时间，切忌勿显色过度。要终止显色，简单的就是倒掉反应液，水洗几次就行。对于变性胶，一般在加入显色液前，用10%乙醇，0.5％HAc固定3min，然后一样操作。当然对于琼脂糖电泳，可以试试国内生物公司的goldview染料，例如博大泰克生物公司的goldview2，平均比EB灵敏度高10倍，很明显，至少不会比EB差，还比较安全，在紫外灯下呈绿色，单链可能呈红色，看惯了EB换换还是挺舒服！
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