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MCLAB/QuantumScript™逆转录酶/SSII-100/1 Ea

价格
¥3240.00
货号:SSII-100
浏览量:127
品牌:MCLab
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商品描述
UniversalReverseTranscriptaseisamutationwithreducedRNaseHactivityandincreasedThermostABIlity.

Description:
QuantumScript™ReverseTranscriptaseisanewengineeredversionofM-MLVreversetranscriptasewithaminimumRNaseHactivityandenhacedthermostability.Theenzymeispurifiedtohomogeneitytoensurehighperformance.Theoptimalfist-strandCDNAsynthesistemperatureforthisenzymeis42°C,withcDNAproductsizefrom100bpto7Kb.


CatalogNo.             
SSII-100,SSII-200andSSII-300
Source                      
E.coli
Concentration       
200u/μl
StorageBuffer   
20mMTris-HCl(pH7.5),1mMDTT,0.05%(v/v)TritonX-100,0.1mMEDTA,0.1MNaCland 50%(v/v)glycerol.
ReactionBuffer(5x) 
250mMTris-HCl(pH8.3),375mMKCl,15mMMgCl2,and50mMDTT
UnitDefinition     
OneunitoftheenzymeincorporatesInmoleofdTTPintoacid-precipitablematerialin10minutesat37˚Cusingpoly(A):oligo(dT)25astemplate-primer.
QualityControl     
Thisenzymehaspassedthequalitycontrolassays:SDS-PAGEanalysisforpurity,functionalabsenceofendonuclease/nickaseactivities,functionalabsenceofexonucleaseactivities,functionalabsenceofproteaseactivity.

StorageandHandling -20˚C

Protocol
First-StrandcDNASynthesis
MaterialstoBeSuppliedbytheUser

  • RNAseinhibitor(Cat.#RNIN-100,RNIN-200,RNIN-300)
  • dNTP,10mM(Cat.#dNTP-10M,dNTP-25M)
  • Nuclease-freewater

Thefollowingprocedureuses10pgto5µgoftotalRNAor10pgto500ngofmRNA.

  1. InasterileRNase-freemicrocentrifugetube,addprimers(200-500ngofoligo(dT)12-18,50-250ngofrandomprimeror2pmolofspecificprimers).Heatthetubeto70°Cfor5minutesandincubateonicefor1mintodenatureanypossIBLesecondarystructurewithinthetemplate.Spinbrieflytocollectthesolutionatthebottomofthetube.
  2. Addthefollowingcomponentstotheannealedprimer/templateintheordershown.
    Note:DonotaltertheratioofprimertomRNA.
    5µl5XReactionBuffer;5µlof10mMdNTPmixture(10mMeachdATP,dGTP,dCTPanddTTP)
    25unitsRNAseInhibitor
    0.5µlQuantumScriptReverseTranscriptase(100u/μl)
    Addnuclease-freewatertofinalvolume25µl
  3. Mixgently.Forrandomprimers,incubatetubeat25°Cfor5min.Performfirst-strandsynthesisat42°Cfor30-60min.Reactiontemperaturemaybeoptimizedbetween50°C-60°Cfordifficulttemplatewithhighsecondarystructure.
  4. Inactivatetheenzymebyincubationat70°Cfor15minafterreaction.
  5. WhenperformPCRamplificationafterstep4,removalofRNAishighlyrecommendedpriortothePCRamplificationtoensuretheyieldofPCRproduct.Additionof2unitsofRNaseH(Cat.#RNHE-100,RNHE-200,RNHE-300)and20minincubationat37°CisrecommendedfortheremovalofRNA.Standardprotocolsforsecond-strandsynthesismaybefoundinreference2.

Note:The5XReactionBufferiscompatiblewithenzymesusedinanumberofdownstreamapplications.TypicallythereisnoneedforphenolextractionsorethanolprecipitationsusingthisprotocolbeforeanyPCRamplification.

 

IV.References

  1. Roth,M.J.,Tanese,N.andGoff,S.P.(1985)PurificationandcharacterizationofmurineretroviralreversetranscriptaseexpressedinEscherichiacoli.J.Biol.Chem.260,9326–35.
  2. Sambrook,J.,Fritsch,E.F.andManiatis,T.(1989)In:MolecularCloning:A;LaboratoryManual,ColdSpringHarborLaboratory,ColdSpringHarbor,NewYork,8.64.

 

Molecular Cloning Laboratories(MCLAB)成立于1998年,是为生命科学界提供基因组研究耗材和服务的先进者。 MCLAB提供具有成本效益的消耗品和试剂,专注于代以及新一代测序和DNA片段分析。我们提供大量分子生物学相关产品,包括抗体,生化试剂,克隆试剂盒,酶,PCR试剂盒,蛋白质凝胶和溶液等。作为我们自己的制造商,我们可以控制生产流程,并大限度地减少定制和大规模订单的延迟。它有助于确保我们的客户获得高质量和价值。 MCLAB拥有一支由20 多位经验丰富的科学家组成的团队,致力于为研究人员提供的服务。我们专注于基因组学领域,拥有DNA测序,发酵,片段分析,分子克隆,过表达,蛋白质纯化和蛋白质合成方面的专家。我们采用量身定制的客户服务方式,让您有机会定制您的项目,并直接与我们的科学家团队交流以获得技术支持。凭借二十多年的经验,我们才华横溢,技术的员工致力于为您提供所需的成果。 10 x PBS(磷酸盐缓冲盐水)   磷酸盐缓冲盐水(PBS)是一种平衡盐溶液,用于各种细胞培养应用,例如在解离前洗涤细胞,运输细胞或组织样品,稀释细胞用于计数和制备试剂。PBS配制成不含钙和镁,用于在细胞解离前从培养物中冲洗螯合剂。 名称 货号 描述 10 x PBS(磷酸盐缓冲盐水) PBS10-100 500毫升 10 x PBS(磷酸盐缓冲盐水) PBS10-200 1升 10 x PBS(磷酸盐缓冲盐水) PBS10-OEM OEM 描述: 磷酸盐缓冲盐水(PBS)是一种平衡盐溶液,用于各种细胞培养应用,如解离前洗涤细胞,运输细胞或组织样品,稀释细胞进行计数,以及制备试剂。PBS配制成不含钙和镁,用于在细胞解离前从培养物中冲洗螯合剂。 应用: 浓缩的标准磷酸盐缓冲溶液。 pH范围: 7.3 - 7.5  推荐储存条件:室温 部分产品: 名称 货号 尺寸 浓度 大肠杆菌DNA连接酶 EDLA-100 1,000个单位 10,000 U / ml 大肠杆菌DNA连接酶 EDLA-200 5,000个单位 10,000 U / ml 大肠杆菌DNA连接酶 EDLA-OEM 任何尺寸     APE 1 APE-100 3,750 units 15,000 U/ml APE 1 APE-200 15,000 units 15,000 U/ml APE 1 APE-OEM Any Size     名称 货号 描述 I-5™2X高保真混色 I5HM-100 100次反应(50μl体积) I-5™2X高保真混色 I5HM-200 500次反应(50μl体积) I-5™2X高保真混色 I5HM-5000 5,000次反应(50μl体积) I-5™2X高保真混色 I5HM-25K 25,000次反应(50μl体积) I-5™2X高保真混色 I5HM-OEM OEM 名称 货号 描述 2x BlueStar™PCR Master Mix BSPM-100 100次反应(50μl体积) 2x BlueStar™PCR Master Mix BSPM-200 1,000次反应(50μl体积)     上海起发实验试剂有限公司是实验试剂一站式采购服务商 1:强大的进口辐射能力,血清、抗体、耗材、大部分限制进口品等。 2:产品种类齐全,经营超过700多个品牌,基本涵盖所有生物实验试剂耗材。 3:提供加急服务,货品一般1-2周到货。 4:富有竞争力的价格优势,绝大部分价格有优势。 5:多年积累良好的信誉,大部分客户提供货到付款服务。客户包括清华、北大、交大、复旦、中山等100多所高校,ROCHE,阿斯利康、国药、fisher等知名药企。 6:我们还是Santa,Advanced Biotechnologies Inc,Athens Research & Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. FormuMax Scientific,Inc, Genebridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,omicronbio, Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,RESEARCH DIETS,INC,sterlitech;sysy,TriLink BioTechnologies,Inc;worthington-biochem,zyagen等几十家国外公司授权代理。 7:我们还是invitrogen,qiagen,MiraiBioam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等知名大品牌批发,欢迎合作。