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荧光定量PCR:简介,原理,应用
犹豫的汉堡2021-07-20
可以事先混合，混合液作为实时荧光用的最好还是现配现用，毕竟这是一个反应比较灵敏的实验。.....
Northern 杂交温度怎么设定,我用的是50bp标记引物作为探针的 雨露...
【神恋】∞1782018-04-02
一般Taqman定量PCR实验过程为：目的基因查找比对→探针与引物设计→探针与引物合成→配置反应体系→反应参数→重复实验，优化条件→获得曲线数据，比对标准曲线→再重复验证。.....
【求助】怎样设计miRNA RTPCR 引物 经验共享 分析测试百科
比你呆VH2018-03-27
miRNA引物设计（茎环法+染料法检测）设计方法：通用茎环后端加miRNA后面6个碱基的反向互补序列为反转录引物，正向引物为miRNA去除后面6个碱基的序列，反向引物在茎环上。反转录茎环通用序列：GTCGTATCCAGTGCGTGTCGTGGAGTCGGCAATTGCACTGGATACGACmiRNA序列：>mmu-miR-99b-5pMIMAT0000132 Mus musculus miR-99b-5pCACCCGUAGAACCGACCUUGCGmmu-miR-99b-5p反转录颈环引........
基因探针是DNA还是RNA,是单链还是双链?
willion19822018-03-26
如题.....
酶的必须基因可分为哪几种?_
2018-03-25
探针是能与特异靶分子反应并带有供反应后检测的合适标记物的分子。利用核苷酸碱基顺序互补的原理，用特异的基因探针即识别特异碱基序列的有标记的一段单链DNA（或RNA）分子，与被测定的靶序列互补，以检测被测靶序列的技术叫核酸探针技术。探针制备就是将目的基因进行标记。特异性探针有三种形式——cDNA、RNA、寡核苷酸。cDNA和寡核苷酸是目前最常采用的探针。RNA探针用途很广，也容易获得，但其不稳定性限制了其商业用途。cDNA探针的获得是，将特定的基因片段装载到质粒或噬菌体中，经过扩增、酶切、纯化等复杂........
荧光定量PCR(二) — 引物与探针
喜洋洋06682018-01-23
实时定量的引物设计要求比较高，可以按普通引物设计的方法来做，但是设计时要注意扩增的片段不能太大，最好在250bp-100bp之间。同时要保证这对引物有绝对的特异性，因为要是产生非特异性扩增的话，就不能准确的计量模板量了.....
定量PCR基本原理及方法
慕斯帅哥TA仝2018-01-23
肯定是tagman探针做出来的结果好，但是贵啊。引物设计略有不一样，但都可用Primer5设计。.....
PCB沉金工艺介绍解析.ppt
wbcldx2018-01-23
通常不会通用的。除了引物设计的一些基本原则以外，他俩的引物设计要求是不一样的。原位杂交引物要求： 1. 为了避免检测mRNA时基因组序列的干扰,设计探针时尽量选择在跨内含子的部位。2. 通常探针的长度（既PCR产物长度）以100-400bp为宜，过长不易穿透组织，杂交效率减低；过短特异性低。 而Realtime引物设计：1.产物长度80-150bp为宜，可延伸到300bp。而且你做实时定量的时候，还要做标准曲线，确定引物的扩增效率好不好。.....
如何设计荧光定量PCR的引物及TaqMan探针
2018-01-23
关键是你稀释后的还是稀释前的，如果没稀释，只要不是在太阳下晒就没事。如果稀释过，建议试用一下。.....
Southern Blot印迹杂交技术服务
c在奇迹04462018-01-23
1）PCR 引物设计 首先，将目标 DNA 片段装入 Channel,并激活 Channel。点击主菜单栏中的 Primer 主菜 单，出现下 拉菜单，如下所示： 点击 Design PCR Primers for DNA 命令，出现下列对话框： 参数说明如下： Primer locations on target 引物........
PCR技术的原理与方法
呆包子2018-01-23
大学知识即可，不要网上摘的.....
反转录引物的选择与RealTimePCR引物设计的要求
胖旨嘿532018-01-23
如果你做的事荧光定量PCR，其引物和一般引物在构成上是没有什么区别的，只是要更加注意引物二聚体、PCR产物大小等问题。染料法不需要其他东西，探针法还需要taqman探针，这个探针的设计是比较有讲究的，并且上面有荧光集团和猝灭基团。具体设计，一般使用相关软件进行。.....
经验分享—原代细胞获取和培养| 每日生物评论
2018-01-23
是RNA探针。TaqMan 荧光探针是一种寡核苷酸探针，荧光基团连接在探针的5’末端，而淬灭剂则在3’末端。PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR扩增时，Taq酶的5'－3'外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。常用的荧光基团是FAM，TET，VIC，HEX。 而新型TaqMa........
新型冠状病毒荧光PCR引物探针设计之我见(一) 分析行业新闻
rnbzd2018-01-23
请问为设计某病毒的荧光PCR引物和探针应事先搜集至少多少个相关病毒株基因序列，才能保证找到基因的保守区段以确保所设计的引物和探针的有效性和可靠性。谢谢。.....
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