相关文章
- 转基因与基因突变有什么区别?_
- daito熔断器厂家daito熔断器厂家、公司、企业 公司...
- 细胞冻存的方法与步骤
- 如何快速高效的建立稳定细胞株
- RhodaminePhalloidin/Calcofluor...
- 牛血清在细胞培养中如何操作及遇到的问题_腾讯新闻
- Daelim Brochure_Chinese下载_在线阅读...
- 2%多聚甲醛固定剂配方二则_实验方法_
- 核糖核酸酶 T1 (米曲酶)(CAS No. 9026124...
- EM Fixation of Embryos 线虫实验 ...
- 琼脂糖胶原复合水凝胶的制备及性能研究
- 请教0.1mol/L(PH7.0)的磷酸盐缓冲液怎么配制? ...
促销商品
最新问答
- [07-25]【求助】关于荧光定量PCR加样量问题_PCR_生命科学仪器_仪器论坛
- [01-17]微管蛋白Tubulin活细胞荧光探针/荧光染料_价格厂家供应商_艾美捷...
- [01-17]FCM分析中对荧光染料的要求是_
- [01-17]荧光染料cfse_荧光染料cfse【价格,厂家,图片,批发,采购】
- [01-17]荧光定量PCR:染料法VS探针法
- [08-18]流式细胞术在精子功能检测中的应用
- [08-19]新型水溶性荧光材料的合成..
- [08-06]分子生物学常用荧光核酸染料.doc
- [07-24]【求助】标准曲线怎么做_液相色谱(LC)仪器社区论坛
精选品牌
热卖商品
我是一个新手。做了两次real-timePCR（SYBRGREENI）标准曲线都很差劲，请好心的大侠们帮忙指点迷津。
标准品是用质粒DNA做了。第一个图是按10倍梯度进行稀释,以10^3～10^9copy/μl7个浓度的标准模板系列作为标准品；第二个图是按10倍梯度进行稀释，以50～0.0005ng/ul6个浓度的标准模板系列作为标准品，得到的标准曲线的参数值分别是R^2＝0.87998694<0.99，Slope＝-1.403786（图一）；R^2＝0.9702126<0.99,slope=-1.5033078.
我应该从哪些方面来改进我的实验？紧急求助！
标准品是用质粒DNA做了。第一个图是按10倍梯度进行稀释,以10^3～10^9copy/μl7个浓度的标准模板系列作为标准品；第二个图是按10倍梯度进行稀释，以50～0.0005ng/ul6个浓度的标准模板系列作为标准品，得到的标准曲线的参数值分别是R^2＝0.87998694<0.99，Slope＝-1.403786（图一）；R^2＝0.9702126<0.99,slope=-1.5033078.
我应该从哪些方面来改进我的实验？紧急求助！
相关回复
-
已帮助 0人
-
已帮助 0人
-
回复：时间：2006-11-04
我想从两个方面来回答你的问题，一，你的质粒标准品在进行稀释时，你稀释的准确吗，一般是多取一点原样进行稀释以减少稀释误差；二，你用的荧光染料SYBRGREENI，此种染料可以跟所有的双链DNA结合，包括引物二聚体，包括其它的非特异性扩增，不知道你分析了你的熔解曲线了没有，看看是不是只有一个峰？建议你把你的熔解曲线的图也传上来。标准曲线好的话一般要求R^2＝0.99以上呢，至少应该是两个9。
-
已帮助 0人
-
回复：时间：2006-10-27
谢谢你。我是在别人实验室做的real-time，没有要到SDS的安装软件。明天我去把融解曲线拷下来，再请你看看。可能我稀释不准确，我是用TE稀释的，取1ul50ng/ul的溶液+9ulTE得到5ng/ul的溶液，再从1ul5ng/ul的溶液+9ulTE得到0.5ng/ul的溶液，以此类推，得到7个浓度的标准模板系列。是不是稀释不准确？
相关问题
- 1627149603【求助】关于荧光定量PCR加样量问题_PCR_生命科学仪器_仪器论坛
- 1516139743微管蛋白Tubulin活细胞荧光探针/荧光染料_价格厂家供应商_艾美捷...
- 1516139743FCM分析中对荧光染料的要求是_
- 1516139785荧光染料cfse_荧光染料cfse【价格,厂家,图片,批发,采购】
- 1516139743荧光定量PCR:染料法VS探针法
- 1629223202流式细胞术在精子功能检测中的应用
- 1629309602新型水溶性荧光材料的合成..
- 1628186402分子生物学常用荧光核酸染料.doc
- 1627063202【求助】标准曲线怎么做_液相色谱(LC)仪器社区论坛
- 1628100001用不同荧光染料标记的抗体,分别与小鼠细胞和人细胞的细胞膜上的一...
- 1629050403荧光定量PCR结果如何处理 分子生物 综合其他 论坛...
- 1516139785荧光染色
推荐产品
