2007-05-22【求助】Takara 的cDNA文库构建试剂盒？？

我做cDNA文库,购买的就是TaKaRa的.但我是单个买的.单买的AMV,单买的RNase Inhibitor..........没买试剂盒用.根据前届学长讲试剂盒没有单买的好用.

我也准备单买，比较便宜。。

做酵母双杂交吧,这个试剂盒还可以,但是应用的SMART技术虽然可以得到全长CDNA,缺点是缺乏大片断,在VIP数据库中有一篇文章,是使用一定的方法,改善SMART技术以提高大片断的含量,我试过觉得非常不错,你可以试一试,而且做SMART技术对于温度的准确性要求很高,一定要找一台号的PCR仪器,而且这个PCR中有一步骤是LD-PCR,有的PCR仪器可以直接设置每一次循环增加5分钟,有的却不可以

很感谢各位的指导，我要构建的是植物CDNA噬菌体文库，而TAKARA的是质粒文库，看过不少文献报道用得最多是SMART技术构库，但由于当前该技术涉及专利问题，全世界都停止销售。还有的是用Stratagene公司文库构建试剂盒，但贵得可怕，八折后也要1.8万，还不算MRNA纯化试剂，我们实验室目前还没有人构过文库，我现在不知道是买试剂盒还是自己单买试剂做？老板说给我两万元，对一个硕士来说，已算多了。总RNA要先纯化才用于构库，mRNA纯化试剂盒我又该如何选择？我学的是发酵专业，但做的是分子生物学方面的东东，烦请各位战友给我指点一下......谢谢大家

用TaKaRa的试剂盒发表的文章很少啊，在国际上能被承认吗？

我建的是昆虫触角的CDNA文库用的是Clontech的SMATRcDNALibraryConstruction试剂盒货号634903另外再加上做LD-PCR的试剂盒Advantage2PCRKit就行了货号639207两个加起来我花了大概是不到8000块钱吧

另外，SMART建CDNA文库是可以直接用总RNA,不必纯化mRNA.