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精英家教网高中生物题目详情6.
(1)反转录的原料是(4种)脱氧核糖核苷酸,需要的酶是逆转录酶.
(2)在构建重组质粒时,目的基因应插入到该质粒的位置是F(或反转录病毒序列),此过程需使用的酶是限制酶和DNA连接酶.为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌,一般需要用添加含抗生素A的培养基进行培养.
分析分析题图:图示为一种表达型质粒的结构示意图,该质粒含有E、F、H三种限制酶的酶切位点;含有抗生素A抗性基因,可作为标记基因;含有“逆转录病毒序列”,该序列可以整合到动物细胞的染色体上,不断地表达其携带的目的基因,获得大量重组逆转录病毒.
解答解:(1)逆转录是以RNA为模板合成DNA的过程,因此需要以四种脱氧核苷酸为原料,该过程需要逆转录酶的催化.
(2)根据题干信息“逆转录病毒序列可以整合到动物细胞的染色体上,不断地表达其携带的目的基因”可知,在构建重组质粒时,应将目的基因插入该质粒的F逆转录病毒序列中;构建基因表达载体时,首先应选用限制酶切割质粒和含有目的基因的外源DNA分子,此外还需要DNA连接酶将目的基因与运载体连接形成重组DNA分子.标记基因是抗生素A抗性基因,因此可用含有抗生素A的培养基筛选含有重组质粒的大肠杆菌.
故答案为:
(1)(4种)脱氧核糖核苷酸逆转录酶
(2)F(或反转录病毒序列)限制酶和DNA连接酶含抗生素A
点评本题结合质粒结构示意图,考查基因工程、基因分离定律的实质及应用,要求考生识记基因工程的工具及操作步骤,能根据题干信息和图示信息选择合适的限制酶;掌握基因分离定律的实质,明确转基因生物可被视为杂合子,再根据题干要求答题.
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