一材料与设备

1)10XT4RNA连接酶缓冲液：50mmol/LTris(pH7,8)，l0mmol/LMgCl₂，5mmol/LDTT,1mmol/LATP

2)无核酸酶的水

3)FEG(polyethyleneglycol)40%

4)RNA酶抑制剂

5)T4RNA连接酶

6)供体（donor)RNA

7)受体（acceptor)RNA


(二）操作方法

1)进行RNA与RNA分子连接的反应体系如下：

供体(donor)RNA                                             100-500ng

受体(acceptor)RNA                                           250ng

10XT4RNA连接酶缓冲液                  4ul

RNasin核酸酶抑制剂(40U/ul)                            1ul

PEG,40%                                                            20ul

T4RNA连接酶(9-12U/u1)                                  1ul

补无核酸酶的水至终体积为                4u1

2)37℃孵育30min，或16℃反应过夜.

3)纯化回收，一20℃保存。