一、材料

1.缓冲液和溶液

10XBFTE电泳缓冲液

DMSO

乙二醇

乙二醇反应混合物

RNA凝胶上样缓冲液

2.凝胶

琼脂糖凝胶

3.核酸和寡核苷

RNA样品

RNA大小标准参照物

4.专用装置

水平电泳装置

透明尺

预置到55℃的水浴

二、方法

1.配制乙二醛变性反应液。在无菌离心管中混合：

RNA（总共10μg）1~2μl，乙二醇反应缓冲液10μl。

2.盖上离心管的盖子，将RNA溶液在55℃放置60min,在冰水中冰浴10min,然后离心5s，使所有液体沉到离心管底部。

3.在样品加热过程中，将琼脂糖凝胶装到水平电泳仪的盒子中。加入足够的1XBPTE电泳缓冲液，使其没过凝胶约1mmol/L。

4.将1~2μlRNA上样缓冲液加到乙二醛化的RNA样品中，然后马上把RNA样品加到凝胶加样孔中，留着两边最外面的两个孔不要加样。将RNA相对分子质标准参照物加到最外面的孔中。

5.以5V/cm的电压进行电泳，直到溴酚蓝迁移大约8cm。

6.将凝胶放在保鲜膜上，在紫外灯下观察RNA。把透明尺和凝胶对齐，在紫外灯下拍照。

7.在照片上量出从加样孔到各RNA条带的距离。以RNA片断大小的对数（log₁₀）值对迁移的距离作图。用得到的曲线计算点杂交检测到的RNA的大小。

8.用上行或下行毛细管转移法把RNA固定在固体支持物上。