1）将醋酸纤维素薄膜置于MD/His-平板的His+转化子菌落上,用涂布棒轻压使醋酸纤维素薄膜完全湿润并赶尽气泡,使所有菌落转移到醋酸纤维素薄膜上.2)在BMMY板上置一同样大小的硝酸纤维素薄膜,并将醋酸纤维素薄膜菌落向上置于硝酸纤维素薄膜上.30℃孵育18h后,将醋酸纤维素薄膜移至MDP2His平板上,4℃保存3)将硝酸纤维素薄膜取下,6%小牛血清37℃封闭2h,TBS-T(Tris-NaCl缓冲液加0105%吐温20)洗3次(每次10min).加一抗室温孵育2h,TBS－T洗膜3次.然后二抗室温孵育2h,TBS2T洗膜3次.最后显色这时，你可以看到强弱不等的颜色，挑选染色最强的克隆，做诱导表达进一步验证操作时，一定要记好位置，以免不能将膜上的克隆和板上的克隆对上。

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