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老师 您好! 检测碱性磷酸酶活力时,底物溶液是怎么配置的阿? 谢谢!
随着生物技术的不断发展,基因工程表达体系的生产能力大幅度增加,不少基因工程药物的生产规模已达数千甚至万升级发酵罐。细胞表达量可达数g/L甚至10g/L。种类丰富的高表达量上游产品对下游纯化提出了挑战,尤其是目前的纯化工艺中多采用琼脂糖基质的微球作为层析填料,该基质微球虽生物相容性好,但骨架刚性低,在较高的压力下容易出现变形或者孔道的改变,影响纯化效率。很多企业只能以牺牲高流速的形式来保证纯化效率,无形中拉长了蛋白的纯化时间,使蛋白质变性或者解聚失活的风险增加,也使纯化成本进一步增高。
这就要求下游纯化工艺提高单位时间的处理量,国家生化工程技术研究中心(北京)推出的高流速琼脂糖介质产品平台为应对该问题提供了全新的解决途径,作为处理量更快、生产效率更高的介质,高流速琼脂糖介质对于提高企业生产力水平、降低生产成本、促进生物行业发展具有重要意义。
高流速琼脂糖介质具有高刚性的骨架,将高流速与高载量完美地融合在一起,能够迅速、高效地处理目标蛋白。高流速琼脂糖介质在良好的亲水性、化学稳定性以及孔道结构的基础上,刚性更强、传质速度更快,特别适合在更短的时间内处理更多的物料,缩短操作周期。以高流速琼脂糖介质为基质,推出了新型离子交换介质,该介质具有高流速、低反压、高动态载量和高稳定性的特点,能快速实现生物大分子的高通量纯化,为解决纯化难题提供新机会。
表1高强度琼脂糖层析介质的主要性能参数
| 参数 | 指标 |
| 基质 | 6%琼脂 |
| 形状 | 球形 |
| 介质平均粒径 | 90μm |
| 最高流速 | >1000cm/h |
| 最高耐压 | 0.3MPa |
| pH稳定性 | 2-14 |
| 保存 | 4-8℃(20%乙醇) |
高流速琼脂糖介质的关键性能特点包括:
- 高流速、低反压
- 高动态载量
- 良好的化学稳定性
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