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/发布时间:1545760088 /浏览量:178
APBuffer:
- 100mMTris-HCl,pH9.5
- 100mMNaCl
- 10mMMgCl2
PTM:
- PBS
- 0.1%Tween-20
- 2mMMgCl2
SincethisisgenerallydoneinconjunctionwithlacZstaining,embryo/tissueisusuallyfixedasperlacZstaining.Forwholemountstaining,penetrationofstainmaybeimprovedbyfixinginPBS+0.2%glutaraldehyde+0.02%NP-40+0.01%NaDC(at4oC).
- RinseinPBS.
- HeatinactivateendogenousalkalinephosphataseactivitybyincubationinPBSat70-75oCfor30minutes.
- RinseinPBSatRT.
- WashinAPBufferfor10minutes.
- StainwithBMPurpleAPSubstrateat4oCfor0.5to36hours(N.B.IncubationatRTwillgiveaquickerresultbutmayresultinseepageofstaining.Also:NBT/BCIPAPstaininghasbeentriedwith9.5dpcembryosbutgaveamauvebackground).
- WashextensivelyinPTM.
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