干细胞

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最近做了很多小鼠腹腔巨噬细胞,有如下几个问题需要和大家讨论,望经验丰富的同志指点一二。1.关于是否注射淀粉肉汤或是别的刺激物,是不是注射后有两大特点:第一,得到的细胞更多,第二,得到的细胞都是炎性巨噬细胞,而未注射则是非炎性细胞?我做了十来次,有时注射有时不注射(淀粉肉汤),注射后细胞确实多一些。至于炎性与非炎性,有待指教。2.关于分离的巨噬细胞的纯度问题。我这里碰上一个严重的问题就是成纤维细胞的污染。一开始纯化完铺板,基本上看不到成纤维细胞。可是大约12小时之后能够看到几个,24小时之后能够看到大约30%,48小时成纤维细胞能够占据的大约70%的比例。这已经让我完全无法做实验了。另外,我发现注射肉汤后成纤维细胞要少一些。我打算用抑制细胞增殖的5-BrdU来抑制成纤维细胞的增殖,但是不知道会不会对巨噬细胞有影响。有没有人碰上类似情况,请交流。3.关于小鼠周龄的问题。我基本上没有太在乎这个,6-8周龄的做过,更长的也做过,似乎区别不大。

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